للبدء ، قم بإعداد إعداد منصة الجراحة في غرفة بمساحة مقعد 60 سم × 60 سم للعملية. نظف السطح بنسبة 70٪ كحول وقم بتغطيته بمنشفة طبية يمكن التخلص منها. ثم قم بتطهير المنطقة بالأشعة فوق البنفسجية لمدة 30 دقيقة.
تأقلم أنثى C57 السوداء / 6 البالغة من العمر ثمانية أسابيع مع مرفق السكن لمدة أسبوع واحد قبل الجراحة. باستخدام قطعة قطن نظيفة ، ضعي غسول إزالة الشعر على الجزء الخلفي من الفأر المخدر. بعد ثلاث إلى خمس دقائق ، قم بإزالة الشعر باستخدام مسحات الشاش والقطن.
بعد ذلك ، قم بتنظيف البشرة بنسبة 70٪ من الإيثانول. ثبت الماوس على منصة الجراحة بحيث يكون ظهره متجها لأعلى باستخدام شريط مطاطي أو حبل قطني ، وقم بتطبيق محلول اليودوفور لتنظيف الظهر. لاستئصال المبيض ، باستخدام مشرط يمكن التخلص منه ، قم بعمل شق ظهري بطول سنتيمتر واحد طوليا من قاعدة الفخذ إلى أعلى ، مع التأكد من شق الجلد واللفافة تحت الجلد فقط وتجنب قطع الصفاق الخلفي.
بعد ذلك ، اسحب الشق إلى اليسار لتصور وسادة دهنية بيضاء. باستخدام microforceps والمقص ، وقطع 0.5 سم على طول وسادة الدهون البيضاء لفضح تجويف داخل الصفاق. بعد قطع الصفاق الخلفي ، باستخدام microforceps ، ببطء وبلطف إزالة وسادة الدهون البيضاء من تجويف داخل الصفاق.
مباشرة بعد الإزالة ، رطب الأنسجة الدهنية البيضاء بشاش معقم منقوع بالمحلول الملحي بنسبة 0.9٪. في الجزء السفلي من وسادة الدهون البيضاء ، حدد المواد الحبيبية الوردية على أنها مبايض وتأكد من توصيلها بالرحم. باستخدام خيوط قابلة للامتصاص 5O ، اربط نهاية المبيض للرحم.
ثم ، قم بإزالة المبيض الأيسر ، وتجنب الاتصال المباشر بين الأدوات الجراحية والمبيض ، ومنع زرع أنسجة المبيض داخل الصفاق. بعد الجراحة ، ضع وسادة الدهون البيضاء بعناية في التجويف داخل الصفاق. ثم ، باستخدام خياطة قابلة للامتصاص 5-0 ، قم بإجراء خياطة متقطعة على الصفاق الخلفي.
نظف أي مناطق من النزيف بشاش منقوع في محلول ملحي معقم بنسبة 0.9٪. بعد ذلك ، اسحب شق الجلد إلى اليمين وأزل المبيض الأيمن باستخدام نفس الطريقة. قم بإجراء خياطة متقطعة باستخدام 4-0 خيوط غير قابلة للامتصاص ونظف أي نزيف بشاش معقم مبلل بالمحلول الملحي بنسبة 0.9٪.
بعد الانتهاء من كلتا الغرز ، قم بتنظيف الجرح بمحلول اليودوفور. بعد 24 ساعة ، حقن ميلوكسيكام تحت الجلد لتخفيف الألم. راقب الماوس يوميا للتأكد من التئام الجروح الجراحية المناسبة دون أي علامات على حدوث مضاعفات.
بعد ثلاثة أيام ، قم بإطعام الماوس مع استراديول فاليرات الطازجة. لحقن FSH ، قم بإعداد محلول FSH عن طريق إذابة مسحوق FSH البشري المؤتلف في محلول ملحي معقم بنسبة 0.9٪ إلى 100 وحدة دولية لكل ملليلتر. وفقا للنشاط البيولوجي لهرمون FSH المؤتلف ، يتم تطبيق مذيب أو جرعات مختلفة من هرمون FSH المؤتلف عن طريق الحقن داخل الصفاق لمدة أسبوعين.
حددت صور اللطاخة للخلايا الملطخة بالبابانيكولاو بوضوح مراحل الشبق ، الشبق ، metestrus ، و diestrus من دورة الشبق. في المقابل ، فقدت فئران استئصال المبيض الثنائية دورة الشبق. أظهرت طريقة ELIZA انخفاضا كبيرا في مستويات استراديول المصل في فئران استئصال المبيض الثنائية مقارنة بفئران المجموعة الوهمية.
لا يؤثر هرمون الاستروجين الداخلي الذي يتم تصنيعه في أنسجة الغدد التناسلية الإضافية على استقرار مستويات هرمون الاستروجين في نموذج الماوس المعالج ب FSH.