Bereid om te beginnen het operatieplatform voor in een kamer met een werkbank van 60 centimeter bij 60 centimeter voor de operatie. Reinig het oppervlak met 70% alcohol en bedek het met een medische wegwerphanddoek. Desinfecteer het gebied vervolgens gedurende 30 minuten met ultraviolette straling.
Laat het acht weken oude vrouwtje C57 zwart/6 muis een week voor de operatie acclimatiseren in de woonfaciliteit. Breng met een schoon wattenstaafje ontharingslotion aan op de rug van de verdoofde muis. Verwijder na drie tot vijf minuten de haren met gaas en wattenstaafjes.
Reinig vervolgens de huid met 70% ethanol. Bevestig de muis op het operatieplatform met de rug naar boven gericht met behulp van een rubberen strip of katoenen touw en breng jodoforoplossing aan om de rug schoon te maken. Maak voor ovariëctomie met een wegwerpscalpel een dorsale incisie van één centimeter in de lengterichting vanaf de dijbasis naar boven, waarbij u ervoor zorgt dat alleen de huid en de onderhuidse fascia worden ingesneden en niet in het achterste peritoneum snijdt.
Trek vervolgens de incisie naar links om een wit vetkussentje te visualiseren. Knip met een micropincet en een schaar 0,5 centimeter langs het witte vetkussentje om de intraperitoneale holte bloot te leggen. Na het snijden van het achterste peritoneum, verwijdert u met behulp van een micropincet langzaam en voorzichtig het witte vetkussentje uit de intraperitoneale holte.
Bevochtig onmiddellijk na verwijdering het witte vetweefsel met 0,9% steriel met zoutoplossing doordrenkt gaas. Identificeer in het onderste deel van het witte vetkussentje de roze korrelige stoffen als eierstokken en zorg ervoor dat ze verbonden zijn met de baarmoeder. Gebruik 5O resorbeerbare hechtingen om het ovariumuiteinde van de baarmoeder te ligateren.
Verwijder vervolgens de linker eierstok en vermijd direct contact tussen chirurgische instrumenten en de eierstokken, waardoor intraperitoneale implantatie van eierstokweefsel wordt voorkomen. Plaats na de operatie het witte vetkussentje voorzichtig terug in de intraperitoneale holte. Voer vervolgens, met behulp van een 5-0 resorbeerbare hechting, een intermitterende hechting uit op het achterste peritoneum.
Reinig eventuele bloedende plekken met gaas gedrenkt in 0,9% steriele zoutoplossing. Trek vervolgens de huidincisie naar rechts en verwijder de rechter eierstok met dezelfde methode. Voer een intermitterende hechting uit met 4-0 niet-resorbeerbare hechtingen en reinig eventuele bloedingen met 0,9% steriel met zoutoplossing doordrenkt gaas.
Reinig na het voltooien van beide hechtingen de wond met een jodoforoplossing. Injecteer meloxicam na 24 uur subcutaan om de pijn te verlichten. Controleer de muis dagelijks om een goede chirurgische wondgenezing te bevestigen zonder tekenen van complicaties.
Voer de muis na drie dagen met vers bereid oestradiolvaleraat. Bereid voor FSH-injectie FSH-oplossing door recombinant humaan FSH-poeder op te lossen in 0,9% steriele zoutoplossing tot 100 internationale eenheden per milliliter. Afhankelijk van de biologische activiteit van recombinant FSH, oplosmiddel of verschillende doses recombinant FSH toedienen via intraperitoneale injectie gedurende twee weken.
De uitstrijkjes van Papanicolaou-gekleurde cellen identificeerden duidelijk de pro-oestrus-, oestrus-, metestrus- en diestrusstadia van de oestruscyclus. Daarentegen verloren de bilaterale ovariëctomiemuizen de oestruscyclus. De ELIZA-methode toonde een significante afname van de serumoestradiolspiegels bij bilaterale ovariëctomiemuizen in vergelijking met de muizen uit de schijngroep.
Het endogene oestrogeen dat in het extra gonadale weefsel wordt gesynthetiseerd, heeft geen invloed op de stabiliteit van de oestrogeenspiegels in het met FSH behandelde muismodel.
