For å begynne, forberede oppsettet av operasjonsplattformen i et rom med et benkområde på 60 centimeter med 60 centimeter for operasjonen. Rengjør overflaten med 70% alkohol og dekk den med et medisinsk engangshåndkle. Desinfiser deretter området med ultrafiolett stråling i 30 minutter.
Akklimatisere åtte uker gamle kvinnelige C57 svart / 6 mus til boliganlegget i en uke før operasjonen. Bruk en ren bomullspinne, påfør hårfjerningslotion på baksiden av den bedøvede musen. Etter tre til fem minutter, fjern hårene ved hjelp av gasbind og bomullspinne.
Rengjør deretter huden med 70% etanol. Fest musen på operasjonsplattformen med ryggen vendt opp ved hjelp av en gummistrimmel eller bomullstau, og bruk iodophor løsning for å rengjøre ryggen. For ovariektomi, ved hjelp av en engangs skalpell, gjør en centimeter dorsalsnitt i lengderetningen fra lårbunnen og oppover, slik at bare huden og subkutan fascia er snittet og unngår å kutte i bakre peritoneum.
Deretter trekker du snittet til venstre for å visualisere en hvit fettpute. Bruk mikrotang og saks til å kutte 0,5 centimeter langs den hvite fettputen for å eksponere det intraperitoneale hulrommet. Etter å ha kuttet den bakre bukhinnen, ved hjelp av mikrotang, fjern sakte og forsiktig den hvite fettputen fra det intraperitoneale hulrommet.
Umiddelbart etter fjerning, fukt det hvite fettvevet med 0,9% sterilt saltvann-gjennomvåt gasbind. I den nedre delen av den hvite fettputen, identifiser de rosa granulære stoffene som eggstokkene og sørg for at de er koblet til livmoren. Ved hjelp av 5O absorberbare suturer, ligere eggstokkenden av livmoren.
Fjern deretter venstre eggstokk, unngå direkte kontakt mellom kirurgiske instrumenter og eggstokkene, og forhindrer intraperitoneal implantasjon av eggstokkvev. Etter operasjonen, legg forsiktig den hvite fettputen tilbake i det intraperitoneale hulrommet. Deretter, ved hjelp av en 5-0 absorberbar sutur, utfør en intermitterende sutur på bakre peritoneum.
Rengjør eventuelle blødningsområder med gasbind gjennomvåt i 0,9% steril saltvann. Deretter trekker du hudsnittet til høyre og fjerner riktig eggstokk ved hjelp av samme metode. Utfør en intermitterende suturering med 4-0 ikke-absorberbare suturer og rengjør blødning med 0,9% sterilt saltvann-gjennomvåt gasbind.
Etter å ha fullført begge suturene, rengjør såret med en iodophor løsning. Etter 24 timer, injiser meloksikam subkutant for å lindre smerte. Overvåk musen daglig for å bekrefte riktig kirurgisk sårheling uten tegn på komplikasjoner.
Etter tre dager, mate musen med nytilberedt østradiolvalerat. For FSH injeksjon, forberede FSH oppløsning ved å oppløse rekombinant humant FSH pulver i 0,9% steril saltoppløsning til 100 internasjonale enheter per milliliter. I henhold til den biologiske aktiviteten til rekombinant FSH, administrer oppløsningsvæske eller forskjellige doser av rekombinant FSH via intraperitoneal injeksjon i to uker.
Smørebildene av Papanicolaou-fargede celler identifiserte tydelig proestrus-, østrus-, metestrus- og diestrusstadiene i østrussyklusen. I motsetning til dette mistet de bilaterale ovariektomimusene østrussyklusen. ELIZA-metoden viste en signifikant reduksjon i serumøstradiolnivåer i bilaterale ovariektomimus sammenlignet med musene i narregruppen.
Det endogene østrogenet syntetisert i det ekstra gonadale vevet påvirker ikke stabiliteten av østrogennivået i den FSH-behandlede musemodellen.
