Protein Extraction from Human Tear Using Schirmer Strip

Comece cortando e descartando a extremidade frontal da tira de Schirmer contendo as lágrimas humanas secas além da marca de zero milímetro. Em seguida, corte a tira em intervalos de um milímetro e coloque as peças em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro. Em seguida, adicione 100 microlitros de tampão de lise ao tubo da microcentrífuga.

Vórtice a 1000 RPM à temperatura ambiente durante uma hora num misturador térmico. Após breve centrifugação, transfira o sobrenadante para um novo tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitros. Usando pinças limpas, mova as tiras em pontas de pipeta de 200 microlitros.

Coloque as pontas de volta no mesmo tubo de microcentrífuga e, em seguida, centrifugue-o para a máxima recuperação da amostra. Medir a concentração de proteínas utilizando ácido bicinconínico ou um ensaio proteico compatível.