Comece preparando dois detentores de retenção. Use um alicate de fio leve e um fio australiano de 0,014 polegada para fazer um laço helicoidal. Em seguida, prepare molas de aço inoxidável personalizadas e corte a mola em um comprimento apropriado.
Prepare também um fio australiano reto ou fio de aço reto de comprimento de sete milímetros e corte dois pedaços de papel com diâmetros de dois milímetros para usar como barreiras. Em seguida, coloque um mouse anestesiado na mesa de cirurgia e remova cuidadosamente o pelo no topo da cabeça com creme depilatório ou barbeador. Em seguida, desinfete o couro cabeludo do rato usando rodadas alternadas de Iodoform e álcool a 75%.
Posicione o mouse com a cabeça na parte superior e use fitas cirúrgicas para fixar os membros na mesa cirúrgica. Agora, use uma tesoura cirúrgica para realizar um retalho arqueado ao longo do couro cabeludo próximo ao pescoço do rato, expondo totalmente a sutura sagital e o crânio ao redor. Em seguida, fixar o retalho de couro cabeludo com sutura 6-0 na mesa cirúrgica.
Secar o crânio e gravá-lo com ácido fosfórico a 37% por 20 segundos. Em seguida, use soro fisiológico normal para limpar o condicionamento ácido. Coloque os dois suportes em ambos os lados dos ossos parietais, a três milímetros das suturas sagitais e cole-os com um adesivo fotopolimerizável.
Em seguida, coloque de volta o retalho do couro cabeludo. Rotule a posição dos suportes e corte dois pequenos orifícios no couro cabeludo nas posições correspondentes. Redefinir o couro cabeludo do retalho passando simultaneamente as pequenas alças através dos orifícios para expor a superfície da pele.
Para instalar a mola e o fio-guia, corte a mola um milímetro a mais do que a distância entre os dois suportes. Comprimir a mola de pressão e colocá-la entre as pequenas bobinas de ambos os lados. Passe o fio de aço inoxidável através das pequenas bobinas e da mola e solte a mola para obter um impulso inicial de cerca de 30G.
Em seguida, coloque dois pedaços de papel entre a mola e os suportes e cole-os com um adesivo fotopolimerizável para montar barreiras em ambas as extremidades da mola. Após a expansão, micro TC foi utilizada para visualizar as alterações na sutura craniana. Em comparação com os controles, a sutura craniana expandiu-se gradual e significativamente após a aplicação de força por um dia e surgiram protuberâncias ósseas fofas na borda óssea após o quinto dia.
Além disso, a visualização da mineralização pelo método de dupla marcação mostrou que a carga de força ativou significativamente a osteogênese. Osso recém-mineralizado foi observado após sete dias, indicando o processo de remodelação óssea após a expansão da sutura.