पेट्री डिश से एम्स मीडिया को प्रतिस्थापित करके शुरू करें जिसमें माउस रेटिना को कार्बोजेनेटेड एम्स की ताजा आपूर्ति के साथ शामिल किया गया था। कांच की स्लाइड, गैंग्लियन कोशिकाओं पर विच्छेदित माउस रेटिना के एक टुकड़े को रखने के लिए एक विस्तृत मुंह स्थानांतरण पिपेट का उपयोग करें। इसे समतल करने के लिए एक नाजुक कार्य पोंछे के साथ अतिरिक्त तरल को हटा दें।
यदि आवश्यक हो, तो विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत रेटिना किनारों को धीरे से खींचने के लिए एक ठीक टिप पेंटब्रश का उपयोग करें। रेटिना पर नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली के एक सूखे टुकड़े को रखने के लिए बल का उपयोग करें, इसे गैंग्लियन सेल साइड का पालन करें। ग्लास स्लाइड पर नाइट्रोसेल्यूलोज बिछाने के लिए रेटिना को पलटें, और रेटिना के फोटोरिसेप्टर साइड पर एक और सूखी झिल्ली का टुकड़ा रखें।
अब, एम्स मीडिया के साथ पेंटब्रश की नोक गीली करें। समान पालन में सहायता के लिए ऊपरी झिल्ली पर कोमल नीचे की ओर दबाव लागू करें। इसके बाद, निचली झिल्ली को एक जोड़ी बल के साथ कांच में पिन करें।
फिर धीमी, स्थिर गति में ऊपरी झिल्ली को छीलने के लिए सावधानी पूर्वक एक और जोड़ी का उपयोग करें। ऊपरी झिल्ली का निपटान करें जिसमें फोटोरिसेप्टर होते हैं। अंत में, आंतरिक रेटिना युक्त निचली झिल्ली को कार्बोजेनेटेड एम्स मीडिया में वापस करें।
