Human Endometrial Tissue Embedding and Sectioning for Immunohistochemistry and Digital Image Analysis

Per iniziare, selezionare uno stampo di inclusione appropriato che corrisponda alle dimensioni del campione endometriale disidratato. Riempilo con cera di paraffina, riscaldata a 70 gradi Celsius. Posizionare immediatamente il tessuto endometriale umano disidratato nello stampo.

Utilizzare le pinze per regolare con cura il tessuto, per assicurarsi che sia posizionato centralmente. Ora, trasferisci lo stampo sulla piastra di raffreddamento e premi delicatamente il tessuto con una pinzetta mentre la paraffina sul fondo si solidifica. Posiziona la cassetta incorporata sopra lo stampo e ricoprila con altra cera.

Quindi riposizionare lo stampo sulla piastra di raffreddamento. Una volta che la paraffina si è solidificata completamente, rimuovere il blocco e la cassetta attaccata dallo stampo. Per il sezionamento, inserire il blocco sulla clip del campione del microtomo.

Posizionare la lama nel supporto e regolare l'angolo tra il piano dei blocchi e la lama. Ora regola lo spessore della sezione a quattro micrometri. Quindi ruotare il volantino per iniziare ad affettare.

Tagliare sezioni sottili dal blocco per esporre la superficie del tessuto appropriata. Usa il pennello per raccogliere le sezioni continue e complete. Una volta ottenuto un numero sufficiente di sezioni, utilizzare una pinzetta per rimuovere le sezioni non qualificate nella parte anteriore.

Con un pennello, trasferisci le sezioni in un bagno di acqua tiepida, riscaldato a 42 gradi Celsius. Quando le sezioni sono completamente appiattite, utilizzare scivoli antidistacco per sollevarle. Quindi, cuocili in uno scaldavetrini a 65 gradi Celsius per oltre 60 minuti prima di rimuoverli.