시작하려면 섭씨 38도의 가습 인큐베이터에서 수정된 닭고기 알을 부화시킵니다. 그런 다음 HBSS로 채워진 60mm 페트리 접시에 28-32 단계 닭 배아를 놓습니다. 등쪽 배아 피부와 머리를 절개한 후 팔다리 싹을 부드럽게 당겨 몸의 복부 쪽을 아래쪽으로 재배치합니다.
이제 배아체의 양쪽을 따라 전방에서 후방 절개를 만듭니다. 한 쌍의 집게로 팔다리 싹을 세로로 잡고 몸을 안정시킵니다. 워치메이커의 집게를 사용하여 목에서 꼬리 부분까지 피부를 조심스럽게 벗겨냅니다.
날카로운 가위를 사용하여 벗겨진 피부에 아직 붙어 있는 남아 있는 피하 조직을 섬세하게 제거하고 피부 가장자리를 매끄럽게 합니다. 다음으로, 6웰 접시의 각 웰에 2ml의 보충제 DMEM을 추가합니다. 웰에 항생제를 추가한 후 멸균 조직 배양 삽입물을 웰 내부에 넣고 배지가 배양 삽입물의 외부를 둘러싸도록 합니다.
그런 다음 HBSS에 담근 상태에서 피부를 주걱으로 옮겨 주름이 생기거나 접히는 것을 방지합니다. 완료되면 절제된 피부를 HBSS가 함유된 접시에 옮깁니다. 주걱의 피부를 접지 않고 배양 삽입물에 천천히 밀어 넣습니다.
200마이크로리터 피펫을 사용하여 인서트에서 과도한 HBSS를 제거합니다. 마지막으로 섭씨 37도에서 5%의 이산화탄소와 95%의 공기를 혼합하여 피부 이식 배양액을 배양합니다. 이틀에 한 번씩 배지를 교체하십시오.
깃털 primordia는 배양 된 지 이틀 후에 짧은 깃털 싹으로 발달했습니다. 그리고 긴 깃털 싹은 배양 4일 후에 발달했습니다. 피부 플라코드는 측면보다 정중선에서 더 성숙했습니다.