Plaats om te beginnen het gut-on-a-chip-apparaat gedurende 30 minuten in een droge oven op 60 graden Celsius om vocht te verwijderen. Stel het apparaat vervolgens met behulp van een UV-ozongenerator gedurende 60 minuten bloot aan UV- en ozonbehandeling. Zet de inlaat-, bypass- en uitlaatslang van het bovenste microkanaal vast met behulp van bindclips.
Plant de inlaatslang voor het onderste microkanaal en koppel vervolgens de uitlaatslang voor het onderste microkanaal los. Zorg ervoor dat de bypass-slang van het onderste microkanaal open blijft. Voeg met behulp van een P100-micropipet 100 microliter van een 1%-polyethylenimine-oplossing toe via het uitlaatgat van het onderste microkanaal.
Sluit de uitlaatslang voor het onderste microkanaal weer aan. Zet de inlaatbypass- en uitlaatslang van het onderste microkanaal vast, gevolgd door de inlaatslang voor het bovenste microkanaal met behulp van bindclips. Koppel nu de uitlaatslang voor het bovenste microkanaal los en zorg ervoor dat de bypass-slang open blijft.
Voeg vervolgens 100 microliter van een 1%-polyethyleenimine-oplossing toe via het uitlaatgat van het bovenste microkanaal. Sluit de uitlaatslang van het bovenste microkanaal weer aan en laat het apparaat 10 minuten bij kamertemperatuur incuberen. Herhaal de procedure met 0,1% glutaaraldehyde en vervolgens met gedeïoniseerd water om overtollige oppervlakte-activeringsoplossing te verwijderen.
Droog de chip een nacht op 60 graden Celsius in een oven. Haal de chip de volgende dag uit de oven en laat hem 10 minuten afkoelen in een bioveiligheidskast. Zet de inlaat-, bypass- en uitlaatslang van het bovenste microkanaal vast, inclusief de inlaatslang van het onderste microkanaal met behulp van bindclips.
Koppel de uitlaatslang voor het onderste microkanaal los. Voeg 20 microliter extracellulaire matrix, of ECM-mengsel, toe via het uitlaatgat van het onderste microkanaal. Sluit vervolgens de uitlaatslang voor het onderste microkanaal weer aan.
Zet de inlaat-, bypass- en uitlaatslang van het onderste microkanaal vast, inclusief de inlaatslang van het bovenste microkanaal met bindclips. Voeg na het loskoppelen van de uitlaatslang voor het bovenste microkanaal 20 microliter VCM-mengsel toe via het uitlaatgat van het bovenste microkanaal. Maak de uitlaatslang van het bovenste microkanaal weer vast en verwijder vervolgens de bindklem van de uitlaatslang van het onderste kanaal, waarbij u ervoor zorgt dat beide uitlaatbuizen open zijn.
Plaats de chip gedurende een uur in een incubator van 37 graden Celsius 5%kooldioxide.