For å begynne, plasser tarm-on-a-chip-enheten i en tørr ovn satt til 60 grader Celsius i 30 minutter for å eliminere fuktighet. Bruk deretter en UV-ozongenerator til å utsette enheten for UV- og ozonbehandling i 60 minutter. Fest innløps-, bypass- og utløpsrøret til den øvre mikrokanalen ved hjelp av bindeklips.
Plante innløpsslangen for den nedre mikrokanalen, og koble deretter utløpsslangen til den nedre mikrokanalen. Forsikre deg om at bypass-slangen til den nedre mikrokanalen forblir åpen. Bruk en P100-mikropipette til å tilsette 100 mikroliter av en 1% polyetyleniminoppløsning gjennom utløpshullet til den nedre mikrokanalen.
Koble til utløpsslangen for den nedre mikrokanalen. Fest innløpets bypass og utløpsrør på den nedre mikrokanalen, etterfulgt av innløpsslangen for den øvre mikrokanalen ved hjelp av bindeklips. Koble nå utløpsslangen til den øvre mikrokanalen, slik at bypass-slangen forblir åpen.
Deretter tilsettes 100 mikroliter av en 1% polyetyleniminoppløsning gjennom utløpshullet til den øvre mikrokanalen. Sett på utløpsslangen på den øvre mikrokanalen igjen og la enheten inkubere ved romtemperatur i 10 minutter. Gjenta prosedyren med 0,1% glutaraldehyd, og deretter med avionisert vann for å fjerne overflødig overflateaktiveringsløsning.
Tørk brikken over natten ved 60 grader Celsius i en ovn. Neste dag, fjern brikken fra ovnen og la den avkjøles i et biosikkerhetsskap i 10 minutter. Fest innløps-, bypass- og utløpsslangen til den øvre mikrokanalen, inkludert innløpsslangen til den nedre mikrokanalen ved hjelp av bindeklips.
Koble fra utløpsslangen for den nedre mikrokanalen. Tilsett 20 mikroliter ekstracellulær matrise, eller ECM-blanding, gjennom utløpshullet til den nedre mikrokanalen. Fest deretter utløpsslangen til den nedre mikrokanalen igjen.
Fest innløps-, bypass- og utløpsrøret til den nedre mikrokanalen, inkludert innløpsslangen til den øvre mikrokanalen med bindeklips. Etter at utløpsslangen for den øvre mikrokanalen er koblet fra, tilsett 20 mikroliter VCM-blanding gjennom utløpshullet til den øvre mikrokanalen. Fest utløpsslangen til den øvre mikrokanalen igjen, og fjern deretter bindeklipsen fra utløpsslangen på den nedre kanalen, slik at begge utløpsrørene er åpne.
Plasser brikken i en 37 grader Celsius 5% karbondioksid inkubator i en time.