Börja med att placera gut-on-a-chip-enheten i en torr ugn inställd på 60 grader Celsius i 30 minuter för att eliminera fukt. Använd sedan en UV-ozongenerator och utsätt enheten för UV- och ozonbehandling i 60 minuter. Fäst inlopps-, bypass- och utloppsslangen på den övre mikrokanalen med bindemedelsklämmor.
Plantera inloppsslangen för den nedre mikrokanalen och koppla sedan bort utloppsslangen för den nedre mikrokanalen. Se till att bypass-slangen på den nedre mikrokanalen förblir öppen. Använd en P100-mikropipett och tillsätt 100 mikroliter av en 1% polyetyleniminlösning genom utloppshålet på den nedre mikrokanalen.
Återanslut utloppsslangen för den nedre mikrokanalen. Fäst inloppsbypass- och utloppsslangen på den nedre mikrokanalen, följt av inloppsslangen för den övre mikrokanalen med hjälp av bindemedelsklämmor. Koppla nu bort utloppsslangen för den övre mikrokanalen och se till att bypass-slangen förblir öppen.
Tillsätt sedan 100 mikroliter av en 1% polyetyleniminlösning genom utloppshålet på den övre mikrokanalen. Sätt tillbaka utloppsslangen på den övre mikrokanalen och låt enheten inkubera i rumstemperatur i 10 minuter. Upprepa proceduren med 0,1 % glutaraldehyd och sedan med avjoniserat vatten för att ta bort överflödig ytaktiveringslösning.
Torka pommes fritesen över natten i 60 grader Celsius i en ugn. Nästa dag tar du ut chipset ur ugnen och låter det svalna i ett biosäkerhetsskåp i 10 minuter. Säkra inlopps-, bypass- och utloppsslangen på den övre mikrokanalen, inklusive inloppsslangen på den nedre mikrokanalen med hjälp av bindemedelsklämmor.
Koppla bort utloppsslangen för den nedre mikrokanalen. Tillsätt 20 mikroliter extracellulär matris, eller ECM-blandning, genom utloppshålet på den nedre mikrokanalen. Sätt sedan tillbaka utloppsslangen för den nedre mikrokanalen.
Fäst inlopps-, bypass- och utloppsslangen på den nedre mikrokanalen, inklusive inloppsslangen på den övre mikrokanalen med bindemedelsklämmor. Efter att ha kopplat bort utloppsslangen för den övre mikrokanalen, tillsätt 20 mikroliter VCM-blandning genom utloppshålet på den övre mikrokanalen. Sätt tillbaka utloppsslangen på den övre mikrokanalen och ta sedan bort bindemedelsklämman från utloppsslangen på den nedre kanalen, se till att båda utloppsrören är öppna.
Placera chipet i en inkubator för 37 grader Celsius 5 % koldioxid i en timme.