تحضير معلق الخلية من مزارع خلايا الجلد الملتصقة

للبدء ، قم بإزالة الوسط المعني من قوارير الثقافة التي تحتوي على الخلايا الكيراتينية والخلايا الليفية والخلايا الصباغية. اغسل الخلايا برفق بخمسة إلى 10 ملليلتر من برنامج تلفزيوني. أضف الآن 0.5 إلى ملليلتر من محلول Trypsin-EDTA إلى القارورة ، اعتمادا على حجمها.

احتضان القارورة عند 37 درجة مئوية. استخدم المجهر للتحكم في انفصال الخلايا عن السطح. قم بتعليق الخلايا المنفصلة في ضعف حجم معادل التربسين لإلغاء تنشيط التربسين.

ثم انقل التعليق إلى أنبوب سعة 15 ملليلتر. الآن ماصة حوالي 20 ميكرولتر من تعليق خلايا الجلد في أنبوب 1.5 ملليلتر. بمساعدة مقياس الدم ، عد الخلايا بعد ذلك ، قم بطرد الأنبوب عند 300 غرام لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة.

ثم ماصة من معظم طاف وإعادة تعليق بيليه الخلية في كمية صغيرة من السائل المتبقي. أضف حجما متساويا من الوسط الطازج إلى الخلايا المعاد تعليقها. في أنبوب منفصل سعة 15 ملليلتر ، قم بإعداد تعليق الخلية.

قدمت الخلايا الأولية للخلايا الكيراتينية والخلايا الصباغية والخلايا الليفية والخلايا البدينة مورفولوجيتها النموذجية عندما نمت في الوسائط الخاصة بها.