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01:55 min
October 6th, 2023
DOI :
10.3791/200682-v
* These authors contributed equally
Transcript
首先将PRDM置于37摄氏度的水浴中。从液氮中取出含有第 32 天 hESC 衍生的感光祖细胞的冷冻管,并将其保存在干冰上。然后在 37 摄氏度的水浴中解冻冷冻管三到五分钟。
将细胞重悬于一毫升PRDM中。在130G下离心四分钟 除去上清液后,将沉淀重新悬浮在一毫升PRDM中。要计数细胞,取 10 微升细胞悬液,并按照制造商的说明与 0.2% 台盼蓝混合。
将细胞混合物移液到细胞计数室载玻片中,并使用自动细胞计数器测定细胞数量和活力。如果细胞活力高于 70%,则将剩余的细胞悬浮液以 130G 离心 4 分钟。除去上清液并将细胞沉淀重新悬浮在PRDM中进行移植。
使用 10 μL 移液管吸头,将细胞团块重新悬浮在微量离心管中,直到看不到团块。将悬浮液加载到33号注射器中,并确认细胞溶液通过针头挤出。
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