כדי להתחיל, לקחת עכבר מורדם ולהחיל טיפה אחת של 1% tropicamide ו 2.5% phenylephrine לתוך העין כדי להרחיב את האישון. לאחר מכן החל ג'ל עיניים על הקרנית כדי למנוע יובש והרדמה המושרה קטרקט. לאחר מכן, הגדירו מיקרוסקופ פעולה זקוף עם נתיב אור ישיר בסביבה סטרילית לביצוע ההזרקה התת-רשתית.
כדי להכין את מזרק זכוכית 10 מיקרוליטר, לנתק את רכזת המחט ולחבר את המחט 33 מד קהה. קח את מכסה רכזת המתכת וחבר היטב את המחט למזרק. שטפו את המחט במים מזוקקים כדי לבדוק נזילה ופטנטיות מחט.
לאחר מכן רוקנו את המזרק והניחו אותו בצד בזהירות. לאחר מכן, הניחו את העכבר המרדים על כרית וכוונו את עין הטיפול לעבר מטרת המיקרוסקופ. החל 0.5% proparacaine hydrochloride ולחכות 30 שניות.
לאחר מכן להחיל 150 מיקרוליטר של ג'ל עיניים על העין ולהצמיד כיסוי עגול להחליק. בצע בדיקת עיניים ראשונית תוך התבוננות בקרנית, בקשתית, באישון, בעדשה ובלחמית. כוונן את מישור המוקד כדי לדמיין את קרן עין העכבר דרך האישון.
לאחר מכן יישרו את הראש כך שהראש האופטי יתיישר עם מרכז האישון. לאחר מכן, הקש על בסיס הצינור המכיל אבות פוטורצפטור שמקורם ב- HESC כדי לקבל תרחיף תאים אחיד. באמצעות מזרק מיקרוליטר זכוכית 10 מיקרוליטר עם מחט קהה 33 מד, לצייר שני מיקרוליטר של תערובת תאים.
השתמש במחט חד פעמית של 30 מד כדי ליצור פצע סקלרקטומי הממוקם שני מילימטרים מאחורי הלימבוס. שמרו על זווית המחט בכ-45 מעלות כדי למנוע מגע עם העדשה. ברגע שקצה המחט הופך גלוי בתוך העין, משכו בזהירות את המחט.
השליכו את המחט המשומשת לפח חד כדי למנוע פציעות של דקירת מחט. עכשיו לקחת את מזרק זכוכית ולהכניס את המחט הקהה לתוך פצע סקלרקטומיה. מקדמים את המחט הקהה מבלי לגעת בעדשה עד שהיא מגיעה לרשתית הנגדית של פצע הכניסה.
חודרים בעדינות לרשתית עד שנראה ענף לחץ על לובן העין. לאחר מכן הזריקו שני מיקרוליטרים של תרחיף התא או מדיה PRDM לתוך החלל התת רשתית תוך שמירה על לחץ עדין על המזרק. היווצרות של bleb גלוי מצביע על הזרקה מוצלחת.
המתן 10 שניות כדי לאפשר לתאים להתיישב. משכו בעדינות את המחט מהעין. כדי להמחיש את הבלב, הזז את ראש העכבר כדי למקם את העין מתחת למיקרוסקופ ולאבטח את המיקום על ידי החזקת הראש בעדינות.
עבור OCT תוך ניתוחי, השתמש בפונקציה IOCT במיקרוסקופ ההפעלה ובחר קובייה במסך OCT. מקם את אזור הסריקה על ה- bleb על-ידי לחיצה על לחצני החצים. כדי לכוונן את ה-OCT, מרכוז השקופיות והמיקוד לקבלת איכות OCT מיטבית, לחץ על לכידה או סריקה כדי להשיג את סריקת ה-OCT של אזור ה-bleb וסקור את התמונות כדי לבדוק את איכות הסריקות.
לבסוף, להסיר את החלק כיסוי בעדינות לנקות את הג'ל מן העין באמצעות גזה. יש לתת משחה אנטיביוטית פעם אחת לאחר ההזרקה כדי למנוע זיהום. סריקת OCT חשפה ישויות HESC נפרדות התלויות בעין שטופלה בתאים.
לעומת זאת, העין שטופלה במדיה הציגה נוזל לא עכור, ריק מתאים בתוך החלל התת-רשתית.