Isolieren Sie zunächst das Hörepithel aus dem Schläfenbein neugeborener Mäuse und übertragen Sie es auf 10 Milliliter frisches DMEM mit 0,25 % Trypsin, inkubieren Sie die Mischung bei 37 Grad Celsius für 12 Minuten. Mit einer 200-Mikroliter-Pipettenspitze die Haarzellen mit einem Operationsmikroskop vorsichtig von der Basallamina und anderen Zellen trennen. Dann fügen Sie weitere 10 Milliliter Nährmedium hinzu, um die Disaggregation zu hemmen.
Filtern Sie die suspendierten Zellen durch einen 70-Mikrometer-Filter. Das Filtrat wird in einem sauberen 50-Milliliter-Röhrchen aufgefangen und fünf Minuten lang bei 300 g zentrifugiert. Mit einer 1000-Mikroliter-Pipettenspitze werden die Haarzellen durch vorsichtiges Pipettieren in fünf Milliliter Nährmedium resuspendiert.
Legen Sie nun im Voraus ein Deckglas auf den Boden einer Sechs-Well-Platte. Zählen Sie die Zellen und kultivieren Sie sie mit einer Dichte von 10 bis sechs Zellen pro Milliliter in der Sechs-Well-Platte, züchten Sie die Adhärenzzellen in zwei Millilitern DMEM bei 37 Grad Celsius und 5 % Kohlendioxid. Nach einem Tag der Kultivierung klebten die Haarzellen fest am Boden der Schale.
Am dritten Tag hatte sich die Anzahl der Zellen verdoppelt.