Identification of Limbal Niche Cells (LNCs)

为了通过免疫荧光染色鉴定角膜缘生态位细胞或LNC，每孔向在5%基质胶包被的6孔板中培养的LNC中加入1毫升0.25%胰蛋白酶EDTA。通过在 37 摄氏度下孵育板五分钟来消化细胞。通过向细胞悬液中加入 1 毫升含有 MESCM 的敲除血清来淬灭消化。

将细胞悬浮液转移到离心管中，并在小心吸出上清液之前将其离心200G五分钟。将沉淀重新悬浮在一毫升MESCM中。接下来，使用细胞吸凝机，按照制造商的说明将 80 微升细胞悬液均匀地沉积在四个显微镜载玻片上。

用 4% 多