Til at begynde med skal du bruge en inkubator og en LED-mikropladebelysning til at oprette en lysboks til styring af lyseksponering og temperatur. Placer derefter en seks brøndplade på inkubatorens øverste hylde, og kontroller, om lysstrålen jævnt omfatter den. Brug et ark papir til at visualisere fordelingen af lysdækning.
Brug en lysmåler til at måle bestråling og rumlig ensartethed. Mindst en dag før injektioner skal du lave injektionsskåle og agarosebelagte seks brøndplader. Skyl en sprøjteform med embryomedium, og læg forsigtigt på smeltning og agarose.
Når agarosen er størknet, skal du forsigtigt bruge tappen til at fjerne formen. Derefter fremstilles flammede glaspipetter til immunofluorescensforsøg på dechlorerede embryoner. Anbring enden af en glaspipette i en bolle og brænderflamme, og drej kontinuerligt, indtil kanterne bliver glatte.
Forbered en injektionsblanding ved hjælp af mRNA'erne vist her. Til fænotypeanalysen indføres nålen gennem korionen direkte ind i midten af cellen på det ene celletrin, og injicer en nanoliter af injektionsblandingen. Hvis der udføres et immunofluorescensassay, skal du målrette midten af cellen af coatede embryoner på det ene cellestadium.
For begge assays skal der tilberedes nok embryoner til de ikke-eksponerede, ikke-eksponerede injicerede, eksponerede ikke-injicerede og eksponerede injicerede embryoner. Vælg mindst 30 embryoner pr. Tilstand. Til immunofluorescensanalysen fremstilles en yderligere skål, der indeholder ikke-injicerede embryoner som proxy for at vurdere progressionen af udviklingsstadier.
Efter injektion inkuberes embryonerne i petriskåle ved 28 grader Celsius.