Pour commencer, décongelez une bouteille de chaque milieu de décongélation de la cellule nourricière, le supplément A, le supplément B et le supplément C, dans un bain-marie à 37 degrés Celsius. Vous pouvez également les réfrigérer à quatre degrés Celsius pendant 16 à 24 heures. Transférez tout le contenu de chaque bouteille de milieu décongelé dans un tube conique de 15 millilitres ou 50 millilitres.
Pour préparer un milieu de placage complet, prenez une bouteille de milieu de placage et ajoutez 4,5 millilitres de supplément B, suivis de 11 millilitres de supplément A dans le flacon. Dans un flacon séparé, mélangez 100 millilitres de milieu de culture, un millilitre de supplément C et 14 millilitres de supplément A pour préparer le milieu de culture complet. Conservez le reste du supplément C et du supplément A à moins 20 degrés Celsius jusqu’à la préparation du milieu de la deuxième semaine.