Preparation of CNS Tissue for Isolating Cells in EAE Mice

마우스를 누운 자세에 놓고 바늘로 팔다리를 고정하는 것으로 시작합니다. 동물의 앞몸에 75 % 에탄올을 바릅니다. 복부와 흉부의 피부와 근막을 통해 세로 단면을 만듭니다.

흉골 주위의 갈비뼈를 자르고 흉부를 접어 심장에 자유롭게 접근할 수 있도록 합니다. 바늘로 위쪽으로 접힌 흉부를 고정합니다. 가위를 사용하여 오른쪽 아트리움을 엽니다.

캐뉼라를 사용하여 20ml의 일회성 PBS를 좌심실에 도포하여 절개된 우심방을 통해 혈액을 씻어냅니다. 쥐 머리 위의 피부를 잘라 세로로 단면을 만들어 두개골을 노출시키고 집게를 사용하여 머리 주위의 피부를 이동합니다. 시상 봉합사를 따라 가위를 사용하여 두개골을 절개합니다.

절개선을 따라 가위 끝을 삽입하여 칼로트를 뜯습니다. 뇌가 완전히 노출되도록 집게로 칼로트의 나머지 부분을 제거합니다. 뇌를 조심스럽게 꺼내 쥐 뇌 매트릭스에 넣습니다.

면도날을 사용하여 뇌를 1mm 두께의 시상 조각으로 자릅니다. 가위를 사용하여 장골 볏 바로 위의 척추를 자릅니다. 일회성 PBS가 들어 있는 20밀리리터 주사기에 부착된 20게이지 바늘을 척추관에 삽입합니다.

꼬리에서 두개골까지 척수를 척수관 밖으로 내뿜습니다. 메스를 사용하여 척수를 0.5cm 길이로 자릅니다. 뇌와 해당 척수로 구성된 중추신경계 세포 현탁액을 3밀리리터의 차가운 DPBS가 들어 있는 페트리 접시에 보관합니다.