Börja med att dissekera hjärnan och ryggmärgsvävnaden och förvara cellsuspensionen på is. Bered sedan en lämplig volym enzym mix-1 och 2. Överför 1 950 mikroliter enzym mix-1 till C-röret och tillsätt vävnadsbitarna i CNS-cellsuspensionen.
Tillsätt sedan 30 mikroliter enzym mix-2 till C-röret. Stäng C-rören ordentligt och fäst dem upp och ner på hylsan på celldissociatorn med värmare. Kör lämpligt program och observera i minst fem minuter för att säkerställa att alla rör roterar med samma hastighet.
Under tiden, placera en 70-mikronsil på ett 50-milliliters rör och förfukta silen med två milliliter DPBS. Efter avslutat program, lossa C-rören från dissociatorn och centrifugera proverna vid 300 g i en minut vid fyra grader Celsius. Återsuspendera sample och applicera den på den förfuktade silen.
Tillsätt 10 milliliter kall DPBS till det tomma C-röret. Blanda och tillsätt suspensionen på motsvarande sil. Efter att ha kasserat silarna, centrifugera cellsuspensionen igen i 10 minuter och aspirera sedan försiktigt supernatanten för att få en cellpellet.