Başlamak için beyin ve omurilik dokusunu inceleyin ve hücre süspansiyonunu buz üzerinde saklayın. Daha sonra uygun hacimde enzim karışımı-1 ve 2 hazırlayın. 1.950 mikrolitre enzim karışımı-1'i C tüpüne aktarın ve CNS hücre süspansiyonunun doku parçalarını ekleyin.
Daha sonra C-tüpüne 30 mikrolitre enzim karışımı-2 ekleyin. C-tüplerini sıkıca kapatın ve ısıtıcılarla hücre ayrıştırıcının manşonuna baş aşağı takın. Uygun programı çalıştırın ve tüm tüplerin aynı hızda döndüğünden emin olmak için en az beş dakika gözlemleyin.
Bu arada, 50 mililitrelik bir tüpe 70 mikronluk bir süzgeç yerleştirin ve süzgeci iki mililitre DPBS ile önceden nemlendirin. Programın sonlandırılmasından sonra, C tüplerini ayrıştırıcıdan ayırın ve numuneleri dört santigrat derecede bir dakika boyunca 300 g'da santrifüjleyin. Numuneyi tekrar süspanse edin ve önceden nemlendirilmiş süzgecin üzerine uygulayın.
Boş C-tüpüne 10 mililitre soğuk DPBS ekleyin. Süspansiyonu karıştırın ve ilgili süzgecin üzerine ekleyin. Süzgeçleri attıktan sonra, hücre süspansiyonunu tekrar 10 dakika santrifüjleyin ve ardından bir hücre peleti elde etmek için süpernatanı dikkatlice aspire edin.