preparation of the mouth gag for a mouse pulpitis model

Het creëren van een pulpa-ontsteking muismodel met behulp van een nieuwe mondknevel 

The dental pulp, an integral part of the tooth, is responsible for multiple essential functions such as nutrient supply, dentin formation, sensory function, and defense reactions1. Nevertheless, the dental pulp, surrounded by hard tissue, is susceptible to injuries and damages from deep caries, pulpitis, trauma, or subsequent therapies2,3. The absence of functional dental pulp increases the risk of tooth fragility4. Moreover, the loss of pulp vitality in young permanent teeth can adversely affect tooth maturation, and current denture techniques fail to restore the neural feedback offered by healthy pulp4. This situation has led researchers to explore alternative solutions for managing inflamed pulp beyond mere removal.
In 2007, Murray et al. initiated the application of tissue engineering in regenerative endodontics, thereby sparking increased interest in pulp preservation and regeneration5. However, inflamed pulp tissue poses a challenge as cells release inflammatory factors such as IL-6, which recruit inflammatory cells and results in cell necrosis, loss of pulp vitality, and complications in functional recovery6,7. Understanding inflammation and the associated cell death is, therefore, crucial for advancements in the preservation of vital pulp. There are a number of experiments that have been conducted to explore the molecular biology of the inflame pulp in vivo or in vitro8,9. Though in vitro&#160;experiments like 2D or 3D cell cultures have been developed for years and are becoming mature and widely used to test reactions of pulp cells to inflammatory factors, these experiments cannot reflect the interaction between pulp tissue and the systemic immune system10. If the phenomenon being studied is derived from cells of other tissue origin like immune, vascular and nervous system, then pure pulp cell culture will lead to a dead end. Therefore, in vivo experiments are very necessary and referential.
Mice have increasingly become a common choice in inflammation research in vivo&#160;due to their cost-effectiveness, high fertility, and vitality. However, a comprehensive protocol for mice pulpitis model is currently absent, which can serve as a reference. The small size of mice and their sensitivity to stimulation pose significant challenges during experimental procedures. Observing the minuscule teeth concealed deep within the mouse mouth often necessitates the use of a cantilever microscope, notwithstanding the more common presence of desktop microscopes in laboratories. The absence of a mouth opener requires assistance from others. To address this, the group has devised a mouth-gag using readily available materials which aims to provide a standardized and reproducible protocol for constructing the mice pulpitis model. This article details the procedure, covering preoperative preparation, immobilization, pulp exposure surgery, and sample collection on C57 mice. This protocol recommends the use of the mouth-gag, providing information on its structure, production, and application to facilitate other researchers in replicating the procedure.

Auteur in de schijnwerpers: onderzoek naar tandpulp verbeteren met verbeterde muismodellen

Opstelling van een blootstellingsmodel voor muizenpulp met een nieuwe mondknevel voor onderzoek naar pulpitis

Individual experiments like 2D or 3D cell cultures have been widely used to test the reactions of dental pulp cells. These experiments cannot reflect the interaction between pulp tissue and the systemic immune system. Therefore, in vivo experiments are becoming increasingly popular in endodontic research.C57 mice have increasingly become a common choice in inflammation research on dental pulp due to their cost effectiveness, high fertility and vitality. However, the small size of mice and lack of coordination posed significant challenges during experimental procedures. The fixation process is an important factor that higher the technical threshold.We devised a novel mouth gag using readily available materials and simple assemblies to assist researchers in pulp exposure surgery. According to our research, this mouth gag can significantly shorten the time required for beginners to immobilize the mouth and expose the maxillary first molar of mice.

Voorbereiding van de mondknevel voor een muispulpitismodel

Om te beginnen trekt u met uw linkerhand een 8 micron dikke orthodontische boogdraad recht, terwijl u de rechterhand licht gebogen houdt tegen de draadboog. Gebruik een Young lusbuigtang om de bovenrand van het trapezium ongeveer acht millimeter in het midden van de boogdraad te buigen. Zorg ervoor dat punt A zich op de rand van de snavel van de tang bevindt.Houd nu de tang met de linkerhand vast. Klem het vrije uiteinde van de boogdraad vast met de rechterduim en wijsvinger en buig vervolgens de boogdraad vanaf punt A om een hoek van 120 graden te maken. Plaats de boogdraad op een horizontale tafel om te controleren of deze zich op een enkel vlak bevindt.Laat ongeveer negen millimeter aan elke kant van de draad over en gebruik een tang om het vrije uiteinde in een hoek van 75 graden te buigen. Zoek nu punt C, dat ongeveer vijf millimeter van punt B verwijderd is. Buig de draad op punt C om een hoek van 105 graden te maken. Buig op dezelfde manier de draad op de punten D en E.Klem de IK- en KJ-onderdelen tegelijkertijd vast.Dupliceer de A, B, C buigen op de punten L, J en K en buig vervolgens het vrije uiteinde op punt J om het verticaal te maken ten opzichte van het IKJ-vlak. Buig een extra tongspatel voor het mandibulaire deel. Klem punt I vijf millimeter vanaf punt J en buig het vrije uiteinde om het evenwijdig te maken aan zowel het IKJ-vlak als het CD-gedeelte.Laat vervolgens een opening van vijf millimeter vanaf punt I en buig bij punt H de boog verticaal naar de IH- en JIH-vlakken. Lokaliseer punt G op vijf millimeter van H en klem de JIHG-rijstrook vast. Buig vervolgens de boog op punt G.Buig nu het vrije uiteinde symmetrisch ten opzichte van het KJ-vlak.Het vrije uiteinde na punt F moet symmetrisch zijn ten opzichte van het vrije uiteinde bij punt E. Plaats ten slotte rubberen doppen op de vrije uiteinden.

Research

JoVE Journal

Medicine

Preparation of the Mouth Gag for a Mouse Pulpitis Model

Establishment of a Murine Pulp Exposure Model with a Novel Mouth-Gag for Pulpitis Research

Pulpitis, a common cause of natural tooth loss, leads to necrosis and loss of bioactivity in the inflamed dental pulp. Unraveling the mechanisms ...

Using A Mouth Gag for Pulpitis Assessment in Mice

Een mondknevel gebruiken voor beoordeling van pulpitis bij muizen