Fahren Sie fort, um die primordialen Keimzellen oder PGCs aus den Schlacken-Filia-Embryonen zu sammeln. Nach der Montage des Mikromanipulatorsystems. Während Sie unter einem Stereomikroskop arbeiten, verwenden Sie eine Pinzette, um die Embryonen zu übertragen.
Richten Sie die beschichteten Embryonen in zwei Reihen auf einem Objektträger zur PGC-Entnahme entlang zweier Referenzlinien aus. Richten Sie die Embryonen mit der vorderen Seite nach rechts und der ventralen Seite nach oben aus. Bewegen Sie die Spitze der Transplantationsnadel vorsichtig an das vordere Ende eines Embryos.
Penetrieren Sie den Embryo, indem Sie den Mikroskoptisch bewegen und die Nadel leicht zurückziehen. Wenn die Spitze das hintere Ende erreicht. Entleeren Sie das Joch in der Nadel innerhalb der somatischen Zellschicht.
Bewegen Sie die Nadelspitze zum hinteren Pol und laden Sie die PGCs vorsichtig in die Nadel, ohne viel Zeit in Anspruch zu nehmen. Ziehen Sie die Nadel schnell aus dem Embryo heraus. Eigelb und andere Verunreinigungen aus der Nadel entfernen, während die PGCs erhalten bleiben.
Sauberes Silikonöl aus dem Pool in die Nadel füllen. Bevor Sie PGCs von einem neuen Embryo entnehmen, geben Sie so viel Silikonöl wie möglich in die somatische Zellschicht, während Sie die beladenen PGCs in der Nadel lassen. Nachdem Sie PGCs von allen Embryonen in einer Reihe gesammelt haben, legen Sie die PGCs auf die Oberfläche eines Embryos und laden Sie alle Joche oder andere Verunreinigungen auf einen anderen benachbarten Embryo ab.
In ähnlicher Weise werden PGCs von den Embryonen in der zweiten Reihe gesammelt und kombiniert.