원시 생식 세포 또는 PGC의 냉동 보존을 진행합니다. 기증자 배아에서 PGC를 수집하여 배아 표면에 증착한 후. 냉동 보호제 또는 CPA로 이식 바늘을 씻고 새 CPA를 바늘에 넣습니다.
CPA의 부피가 PGC의 부피와 동일한지 확인하면서 배아에 증착된 PGC에 로드된 CPA를 추가합니다. CPA 추가 후 1-2초 후에 PGC 클러스터에서 초과 CPA를 제거합니다. 그런 다음 바늘을 비우고 실리콘 오일을 5초 이상 로드합니다.
수집된 모든 PGC를 니들(needle)에 넣은 다음 실리콘 오일을 다시 5초 이상 로드합니다. PGC가 두 겹의 실리콘 오일 사이에 끼워져 있는지 확인합니다. 연티지를 사용하여 마이크로 매니퓰레이터에서 바늘을 분리하고 바늘 끝을 티슈로 건드리지 않고 바늘 표면에서 기름을 닦아냅니다.
바늘을 바늘 홀더에 부착하고 비닐 테이프를 사용하여 바닥의 제자리에 고정합니다. 바늘이 아래쪽을 향하도록 홀더를 액체 질소에 담가 급속 동결합니다. 액체가 랙에서 거품을 멈출 때까지 홀더를 놓지 마십시오.
홀더를 액상 영역의 액체 질소 저장 탱크에 보관하십시오.