İmmünoglobulin A veya IgA nöropati model fareden izole edilen Peyer yamasının önceden hazırlanmış parafin bölümlerini mumdan arındırmaya başlamak için, her bölümü beş dakika boyunca sırayla ksilen ve etanol gradyanlarına daldırın. Ardından, bölümü damıtılmış suyla durulayın. Antijen alımı için, sodyum sitrat çözeltisini bir otoklavda iki dakika ısıtın.
Daha sonra, doku dilimini çözeltiye yerleştirin ve beş dakika boyunca yüksek bir sıcaklıkta ısıtın. Soğuduktan sonra, bölümü %3'lük bir hidrojen peroksit çözeltisi içinde oda sıcaklığında ışıktan uzakta 15 dakika inkübe edin. Daha sonra doku bölümüne eşit olarak %10 keçi serumu uygulayın ve bölümü tıkamak için oda sıcaklığında 30 dakika inkübe edin.
Bloke edici çözeltiyi çalkaladıktan sonra, her bölüme uygun miktarda hazırlanan primer antikor uygulayın. Islak bir kutuya düz bir şekilde yerleştirilen bölümleri gece boyunca dört santigrat derecede inkübe edin. Ertesi gün, dokuyu bir damla HRP işaretli ikincil antikor ile örtün ve oda sıcaklığında 50 dakika inkübe edin.
Daha sonra her bölüme taze hazırlanmış DAB kromojenik solüsyonu uygulayın ve renk oluşmasını bekleyin. Bölümü hematoksilen ile yaklaşık bir dakika boyunca tekrar boyayın. Ardından, bölümleri mavi renge dönene kadar musluk suyuyla 10 dakika durulayın.
Dehidrasyon için, her bölümü sırayla beş dakika boyunca etanol ve ksilen gradyanlarına yerleştirin. Tüm bölümler hafifçe kuruduktan sonra, her bölümü nötr sakızla kapatın. İmmünohistokimyasal sonuçlar, B hücresi belirteçleri CD20 ve CXCR5 ekspresyonunun IgA nöropati model grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha yüksek olduğunu gösterdi.
Bununla birlikte, diosin moleküler belirteçlerin ekspresyonunu inhibe edebilir.
