للبدء ، قم بزرع خلايا DAKIKI في 96 صفيحة بئر بكثافة 0.4 مليون خلية لكل بئر. قم بإعداد المجموعات التجريبية المختلفة ، وبعد ذلك ، العلاجات المقابلة بناء على طريقة التجميع. احتضان لوحات لمدة 24 ساعة في 37 درجة مئوية و 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون.
بالنسبة لمقايسة السمية الخلوية لنازعة هيدروجين اللاكتات ، أضف خمسة ميكرولترات من المحللة إلى كل بئر في مجموعة التحكم العالية. واحتضان اللوحة عند 5٪ ثاني أكسيد الكربون و 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. ثم أضف 100 ميكرولتر من خليط التفاعل إلى كل بئر.
لإخماد التفاعل ، أضف 50 ميكرولترا من محلول تفاعل التوقف لكل بئر. بالنسبة لفحص Cell Counting Kit-8 ، أو CCK-8 ، بعد الحضانة الأولية لمدة 24 ساعة ، أضف 20 ميكرولترا من كاشف CCK-8 إلى كل بئر. وأعد الألواح إلى الحاضنة بنسبة 5٪ ثاني أكسيد الكربون و 37 درجة مئوية لمدة ساعتين.
أظهرت نتائج مقايسة السمية الخلوية لنازعة هيدروجين اللاكتات سمية خلوية ضئيلة ناتجة عن الديوسين بتركيزات تتراوح من 0.25 إلى 1.0 ميكروغرام لكل ملليلتر ، والتي كانت معدلات إطلاق نازعة هيدروجين اللاكتات أقل من 10٪ CCK-8 أظهر الفحص أنه ، مقارنة بمجموعة النموذج ، يثبط الديوسين تكاثر خلايا DAKIKI المستحثة بواسطة LPS بطريقة تعتمد على التركيز ، مع تركيزات 0.5 و 1.0 ميكروغرام لكل ملليلتر تظهر تثبيطا كبيرا.
