먼저 깨끗한 병에 깨끗한 5mm 유리 구슬 150ml를 넣고 뚜껑을 닫습니다. 닫힌 용기를 충분한 알루미늄 호일로 덮어 용기 접합부에 뚜껑을 숨기고 섭씨 121도에서 20분 동안 오토클레이브합니다. 묘목을 멸균 벤치의 항아리로 옮길 준비가 되면 항아리의 알루미늄 호일과 뚜껑을 제거합니다.
pH 5.7에서 5.9의 절반 강도 Murashige 및 Skoog 배지 35 밀리리터를 항아리에 넣고 비드가 배지와 고르게 코팅되도록 저어줍니다. 3-5개의 묘목을 항아리에 넣고 뿌리 시스템이 유리 구슬 사이에 위치하도록 합니다. 멸균 집게나 숟가락으로 구슬을 조정하여 뿌리를 덮고 배지에서 잎을 들어 올립니다.
용기 상단에 1.25cm 미세 기공 테이프 두 스트립을 고정하고 뚜껑을 부드럽게 위에 놓습니다. 뚜껑과 용기 사이의 틈을 2.5cm 미세 기공 테이프로 밀봉하여 공기 교환을 허용하면서 멸균 상태를 유지하고 용기를 성장 챔버에 넣습니다. 식물이 원하는 나이에 도달하면 병에서 미세 기공 테이프와 뚜껑을 제거합니다.
멸균 테스트를 위해 20 마이크로 리터의 성장 배지를 LB 한천 플레이트에 분취합니다. 25밀리리터 부피 피펫을 사용하여 뿌리를 손상시키지 않고 가능한 한 많은 성장 배지를 제거합니다. 잎이 젖지 않도록 항아리 벽을 따라 50ml의 수집 배지를 추가합니다.
뚜껑을 덮고 항아리를 닫고 멸균 상태에서 2시간 동안 배양합니다. 배양 후 원하는 양의 수집 배지를 튜브로 제거합니다. 뿌리의 무게를 측정하고 한 병에 식물에서 싹을 틔워 식물 무게로 뿌리 삼출물을 정규화합니다.
애기장대(Arabidopsis thaliana) 식물은 두 개의 다른 실험실에서 건강해 보였습니다. 유리병 시스템은 다양한 식물 종과 발달 단계에 적응할 수 있는 것으로 입증되었습니다. 밀은 낙하산 무게가 가장 높았고 수수와 토마토가 그 뒤를 이었습니다.
수수는 뿌리 무게가 가장 높았고, 밀과 Medicago truncatula가 그 뒤를 이었습니다. 애기장대(Arabidopsis thaliana)를 공생 박테리아로 접종해도 식물 표현형이 변하지 않았으며, 접종된 박테리아는 콜로니 형성 단위가 약간 증가하면서 최소 12일 동안 시스템에 잔류했습니다.
