Para comenzar, agregue 150 mililitros de perlas de vidrio limpias de cinco milímetros al frasco limpio y cierre la tapa. Cubra el frasco cerrado con suficiente papel de aluminio para ocultar la tapa de la unión del frasco y el autoclave a 121 grados centígrados durante 20 minutos. Cuando las plántulas estén listas para transferirse al frasco en el banco estéril, retire el papel de aluminio y la tapa del frasco.
Agregue 35 mililitros de medio Murashige y Skoog de concentración media de pH 5.7 a 5.9 al frasco y revuelva las cuentas para cubrir uniformemente con el medio. Introduzca de tres a cinco plántulas en el frasco, asegurándose de que los sistemas de raíces estén colocados entre las cuentas de vidrio. Ajusta las cuentas con pinzas o cucharas estériles para cubrir las raíces y sacar las hojas del medio.
Asegure dos tiras de cinta de microporos de 1,25 centímetros en la parte superior del frasco y coloque suavemente la tapa encima. Selle el espacio entre la tapa y el frasco con cinta de microporos de 2,5 centímetros para mantener la esterilidad y permitir el intercambio de aire, y coloque el frasco en una cámara de crecimiento. Cuando las plantas alcancen la edad deseada, retire la cinta de microporos y la tapa del frasco.
Alícuota 20 microlitros de medio de crecimiento en placa de agar LB para pruebas de esterilidad. Con una pipeta volumétrica de 25 mililitros, elimine la mayor cantidad posible de medio de cultivo sin dañar las raíces. Agregue 50 mililitros de medio de recolección a lo largo de la pared del frasco para evitar mojar las hojas.
Cierre el frasco con tapa e incube en condiciones estériles durante dos horas. Después de la incubación, retire la cantidad deseada de medio de recolección en tubos. Mida el peso de la raíz y el brote de la planta en un frasco para normalizar los exudados de la raíz según el peso de la planta.
Las plantas de Arabidopsis thaliana se veían sanas en dos laboratorios diferentes. El sistema de frascos de vidrio demostró ser adaptable para varias especies de plantas y etapas de desarrollo. El trigo tuvo los pesos más altos en manga, seguido por el sorgo y el tomate.
Mientras que el sorgo tuvo el mayor peso de raíz, seguido por el trigo y Medicago truncatula. La inoculación de Arabidopsis thaliana con bacterias comensales no alteró el fenotipo de la planta, y las bacterias inoculadas persistieron en el sistema durante al menos 12 días con un ligero aumento de las unidades formadoras de colonias.