Per iniziare, posizionare i reni di topo sezionati e fissati in PBS. Tagliare il rene in sezioni spesse un millimetro usando la matrice cerebrale. Trasferire le fette al 4% di paraformaldeide e fissare a quattro gradi Celsius per una notte.
Per la microscopia a foglio leggero, fissare l'intero rene immergendolo in PFA al 4% e incubandolo a quattro gradi Celsius per 48 ore. Per la pulizia dei tessuti, raccogliere i campioni di rene in una provetta da centrifuga da 50 millilitri e quindi eliminarli in L cubo con agitazione a 60 giri/min a 37 gradi Celsius. Sostituire L cubo in modo intermittente fino a ottenere una trasparenza ottica soddisfacente.
Lavare i campioni tre volte in PBS agitando delicatamente a temperatura ambiente per un'ora ciascuno. Quindi applicare cubic R ai campioni e posizionarli per l'agitazione per sei ore. Osservare direttamente i campioni eliminati o conservarli in provette opache riempite di R cubo a temperatura ambiente per una settimana.