formulation of a gavage decoction using traditional chinese medicine and its administration into mice

Formulierung von Kräutersud und Standardisierung der Sonde bei Osteosarkommäusen

Decoction formula is the most commonly used dosage form of the traditional Chinese medicine and the liquid medicinal drugs1,2. The decoction formula of traditional Chinese medicine is processed by decocting the herbs in water after being soaked, followed by filtering to discard the dregs.
Because the decoction formula can be individualized based on clinical necessities, especially in line with the characteristics of evidence-based treatment in traditional Chinese medicine, this dosage form via trans-oral administration has been applied in clinical practice for thousands of years with specific and irreplaceable advantages3,4. The quality of the decoction formula is directly related to the clinical efficacy.&#160;Therefore, the decoction formula must be prepared based on the principles for the standardized decoction methods to ensure the active ingredients are maximally extracted and protected3. Meanwhile, decoction-ready medicines are the main form of raw Chinese herbs used in clinical practice; the quality standards and production methods of prescribed decoction-ready medicines must comply with the provisions of the Chinese Pharmacopoeia2. Moreover, the prescribed decoction-ready medicines must be soaked in cold drinking water for at least 30 min before being decocted in a special pharmaceutical pot by heating5. Studies have shown that most of the active ingredients can be extracted by decocting for two times, and the&#160;Code of Practice for the Administration of Decoction Rooms of Traditional Chinese Medicines in Medical Institutions also prescribes decoction to be done twice4,6,7. If special Chinese herbs, such as one with hard texture or tonics, are prescribed, the decoction time is recommended to be extended. The decoction utensils and storage containers that directly come in contact with the decoction formula, starting from the container in which the prescribed decoction-ready medicines are soaked, should be chemically stable and have lids, such as casseroles, ceramics, glass and stainless steel. However, aluminum and ordinary plastic products should not be used, while iron and other corrosive utensils should be prohibited to avoid possible chemical reactions, which will reduce therapeutic efficacy and even produce harmful effects4,6,7.
Due to the limitations of performing clinical experiments, small animals bearing the human diseases, such as mice, are often used in medical research to explore the therapeutic efficacy and comprehensive mechanisms of different interventions including the decoction formula of traditional Chinese medicine8,9; however, unlike humans, the decoction formulas should be prepared every day, mixed together, and freshly administered 2x a day in clinical practice. Animals are unable to voluntarily take their medications on time with the required dosage, and most of the animal experiments related to traditional Chinese medicine are gavage-based oral administration of the decoction formulas at present. The decoction formulas used for in vivo animal experiments should be prepared in advance, aliquoted, stored at -20 &#176;C and thawed just before use3,4,10. Moreover, substandard animal immobilization and gavage needle manipulation increase the risk of unnecessary injuries and negative emotions. Therefore, as an important method of trans-oral drug delivery, the skilled gavage technique is particularly important to avoid possible esophageal injury and drug spillage, thus ensuring that each model animal receives an equal amount of prescribed herbal medicine to achieve accurate experimental results. Here, we provide a gavage protocol for the decoction formula of traditional Chinese medicine.

Autor im Rampenlicht: Standardisiertes pflanzliches Abkochprotokoll für erweiterte Tierversuche

Sondenstrategie für die Sudformel der Traditionellen Chinesischen Medizin bei Osteosarkom-Modellmäusen

This study provides a detailed and standardized protocol for about precaution preparation under gradual operation that's providing a reference for those in need. Our research ensures that each animal is dosed equally to produce accurate results. Our study aims to maximize the animal protection and improve the reliability of results from studies of about Decoction formulations.

Formulierung eines Sondensuds mit traditioneller chinesischer Medizin und dessen Verabreichung an Mäuse

Weichen Sie zunächst 52,5 Gramm Hedyotis diffusa und 31,5 Gramm des mit Widerhaken versehenen Helmkrautkrauts 30 Minuten lang in Wasser ein. Die Kräuter über einem starken Feuer zum Kochen bringen und dann 15 bis 25 Minuten über einem milden Feuer erhitzen. Als nächstes befestigen Sie mit Gummibändern drei Schichten Gaze über der Öffnung eines Messbechers.Filtern Sie den Sud durch die Gaze. Gießen Sie den gefilterten Sud in einen Behälter. Machen Sie in ähnlicher Weise einen zweiten Sud, indem Sie die Kräuter in Trinkwasser gerade genug kochen, um die Kräuter einzutauchen.Gießen Sie nach dem Kochen den zweiten Sud in denselben Behälter wie den ersten. Weichen Sie nun 42 Gramm Ginseng in Trinkwasser etwa drei Zentimeter über der Oberfläche der Kräuter ein. Kochen Sie den eingeweichten Ginseng 60 Minuten lang über einem starken Feuer.Gießen Sie dann diesen ersten Sud mit den anderen Abkochungen in den Behälter. Machen Sie einen zweiten Ginseng-Sud in Trinkwasser, gerade genug, um das Kraut einzutauchen. Erhitzen Sie diesen Sud 40 Minuten lang über einem milden Feuer und filtern Sie ihn in den Abkochbehälter.Kochen Sie den gefilterten Sud auf starkem Feuer in einem Topf. Senken Sie dann die Flamme auf ein mildes Feuer. Kochen Sie den Sud weiter, bis die gewünschte Konzentration erreicht ist.Pipettieren Sie 21 Milliliter des konzentrierten Suds gemäß der erforderlichen Dosierung für eine Woche in Röhrchen. Lagern Sie die Aliquots im Kühlschrank bei minus 20 Grad Celsius. Platzieren Sie eine Maus auf der Oberfläche eines Mauskäfigs.Fassen Sie seinen Schwanz mit Daumen und Zeigefinger der linken Hand. Halten Sie dann den Maushals mit Daumen, Zeige- und Mittelfinger der rechten Hand fest. Halten Sie die Maus gedrückt, um Kopf, Hals und Körper in einer geraden Linie auszurichten.Führen Sie die geladene Sondennadel von der Ecke in den Mund der Maus ein und drücken Sie die Zunge gegen den Oberkiefer. Halten Sie den Mauskörper in der gleichen Ausrichtung und schieben Sie die Sondennadel vorsichtig entlang der Speiseröhre in Richtung Magen. Injizieren Sie die Abkochformel in den Magen, entfernen Sie dann die Nadel und lassen Sie die Maus wieder in den Käfig zurück.Die Verabreichung des medikamentösen Suds reduzierte das Tumorvolumen des Osteosarkoms bei Mäusen.

Research

JoVE Journal

Medicine

Formulation of a Gavage Decoction Using Traditional Chinese Medicine and its Administration into Mice

Gavage Strategy for Decoction Formula of Traditional Chinese Medicine in Osteosarcoma Model Mice

Decoction formula is the most commonly used dosage form in traditional Chinese medicine and applied in clinical practice for thousands of years by ...

Forschung

Medizin