Pour commencer, plantez des graines d’Arabidopsis thaliana dans le sol. Cultivez-les dans une chambre avec une lumière fluorescente blanche. Ensuite, inoculez une seule colonie de Pseudomonas syringae pv.
tomate DC3000 dans 5 millilitres de milieu liquide King’s B. Incuber la culture à 28 degrés Celsius, en secouant à 200 tours par minute, jusqu’à ce que la culture atteigne la phase de croissance logarithmique tardive. Centrifuger la culture à 6 000 G pendant deux minutes.
Ensuite, remettez en suspension la pastille bactérienne dans un millilitre d’eau stérile. Ensuite, pipetez le surnageant. Et remettre le granulé en suspension dans un millilitre de tampon d’ouverture de stomates.
Mesurez la densité optique de la suspension à 600 nanomètres. Diluer la suspension bactérienne à une densité optique de 0,2, avec un tampon d’ouverture de stomates contenant 0,4 % de tensioactif de silicone. Pour inoculer la suspension bactérienne, placez d’abord les plantes d’Arabidopsis thaliana sur un plateau recouvert d’un couvercle transparent sous la lumière pendant au moins trois heures.
Retirez le couvercle. Utilisez ensuite un aérographe pour pulvériser le dessous des feuilles avec la suspension bactérienne. Après l’inoculation, incubez les plantes sur un plateau recouvert d’un couvercle transparent pour maintenir une humidité relative d’environ 85 %