시작하려면 매트릭스 증착 시드 슬라이스가 포함된 슬라이드를 질량 분석기에 놓습니다. 샘플 이미지를 로드하고 수정 펜 표시를 사용하여 참조된 소프트웨어에서 티칭 포인트를 설정합니다. 그런 다음 99% 데이터 축소 계수를 설정하고 사후 데이터 보정을 위해 FID 파일을 저장한 다음 메서드를 저장합니다.
질량분석기 소프트웨어의 다각형 측정 영역 추가 도구를 사용하여 분석할 영역을 구분합니다. 래스터 너비를 100마이크로미터로 설정합니다. 저장된 방법을 나타내는 측정 영역 파라미터를 편집하고 이미징 실행을 저장합니다.
그런 다음 이미징 수집을 시작합니다. 매트릭스 클러스터와 알려진 오염 물질을 사용하여 교정제 탭의 소프트웨어에서 질량 목록을 생성합니다. 그런 다음 캘리브레이션 탭에서 생성된 질량 목록을 엽니다.
마우스 오른쪽 버튼을 클릭하여 대화 상자를 열고 잠금 질량 설정 옵션을 선택합니다. 0.5 가우스 확장과 3.5 라인 확장이 있는 가우스 윈도우 모드를 선택합니다. 온라인 보정을 선택하지 않은 상태로 둡니다.
모드를 단일로, 임계값을 1000으로, 질량 허용 오차를 5PPM으로 설정합니다. 프로세스로 데이터를 보정하고 2D 직렬 데이터 세트 도구를 저장합니다. 캘리브레이션 후 호환되는 소프트웨어에 도트 MIS 파일을 열고 정규화를 규범 없음에서 RMS 또는 TIC로 변경합니다.
편집 탭을 클릭하고 자동 질량 필터링을 선택합니다. 관심 임계값에서 시작 질량과 끝 질량을 최소 및 최대 Dalton 수로 채우고 확인 아이콘을 클릭합니다. 필터링된 목록에서 Dalton의 관심 질량 값에 해당하는 숫자로 생성된 강조 표시된 관심 피크를 선택합니다.
관심 영역을 더 잘 볼 수 있도록 백분율을 변경합니다. intensity scale bar(강도 스케일 막대)와 color map(컬러 맵) 아이콘을 클릭합니다. 이미지 영역을 클릭하고 드래그하여 마우스를 밀어 관심 영역을 배치합니다.
투명도 백분율을 변경하여 스캔 단면 영상을 배경으로 하는 병합된 신호 영상을 생성합니다. 매핑할 분석물을 알고 있는 경우 각 분석물에 대해 각 M x Z 값을 플로팅하고 생성된 이미지와 스펙트럼 평균 플롯을 저장합니다. 포지티브 모드에서 MALDI IMS에 의해 얻어진 Euterpe precatoria 및 Euterpe edulis 종자 조직의 질량 스펙트럼이 여기에 표시됩니다.
E.precatoria 종자에 대한 이 MALDI IMS 분석은 매트릭스에 소금을 첨가하지 않고 헥소스 올리고머의 부가물을 나타내는 피크를 나타냈습니다. 헥소스 이량체, 삼량체, 사량체, 펜타머, 헥사머 및 최대 14개의 단위 올리고머가 확인되었습니다. E.edulis 종자 조직에 대해서도 동일한 결과를 얻었습니다.
두 샘플에 대한 상자 그림은 종자 배젖에서 발견되는 각 헥소스 올리고머의 피크 강도를 나타내며 분포를 보여주며 올리고머의 높은 중합 함량이 약간 더 높습니다.