כדי להתחיל, ודא כי פריסת המיקרוסקופ מוכן על פני השטח של השולחן האופטי עם כל המרחקים נמדדו במדויק. לאחר מכן הרכיבו את לייזר העירור על השולחן. הגדר שתי קשתית לגובה המיועד של הלייזר, והשתמש בקשתית זו כדי להבטיח שהקרן ישרה וממורכזת.
מקם את שלב התרגום, או TS1, תחת המיקום של מראה 1 או M1. השתמש בזוג הקשתית המוגדרת לגובה המדויק כדי להגדיר את נתיב קרן היציאה הרצוי ולהנחות את המיקום והיישור של כל רכיב מחזיר אור. לאחר מכן, מקם את M1 בחלק העליון של TS1. לאחר מכן הרכבו ויישרו את הדיכרואית מעל השולחן.
באופן דומה, הרכיבו את הגלבו ויישרו אותו עם האיריסים. לאחר ביצוע היישור, מקם את M2 ולאחר מכן חבר את M3 לשולחן. כוונן את הגובה והמיקום עד שהקרן ממורכזת בערך בשני דיסקי היישור מזכוכית חלבית.
הוסף תמיכה ל- M3 לאחר מכן. לאחר מכן, התחל להרכיב את עדשה 1 על השולחן. כוונן את ההטיה ואת המיקום הצידי עד שהקורה ממורכזת בלוחות הזכוכית החלבית מעל M3. מקם את עדשה 2 ובדוק את ההתנגשות באמצעות מראה כדי להקפיץ את הקרן על משטח מרוחק.
השתמש בכרטיס אינדקס או במטרה כדי לעקוב אחר הקרן ולוודא שהקרן אינה משתנה בגודלה. לאחר מכן התאם את מיקום x, y של חור הסיכה עם תושבת XY ואת המרחק הצירי עם השלב החד ממדי כדי למקסם את השידור. כוונן את עדשה 4 באופן אקסיאלי כדי למקד את קרן העירור על פני השטח של הגלבו וסדר את עדשה 3 על השולחן, ואחריה SL1.
התאימו את המרחק הצירי של SL1 ליצירת טלסקופ עם עדשה 4, ולאחר מכן מקמו את TL1 במקביל ל-SL1. כוונו את גובה מטרה 1 במערכת הכלובים עד שהקרן יוצרת דיסק אוורירי על התקרה. ולאחר מכן המשך להתאים עד למזעור גודל הדיסק.
מקם את המראה המרובעת בשלב הדגימה של מטרה 1 וכוונן את המראה באופן אקסיאלי עד למזעור פרופיל הקרן לאחר הדיכרואית. הרכיבו את לייזר היישור על ידי החלקת מוטות הכלוב לתוך החורים הריקים של שני לוחות הכלוב. השתמש בתושבת מראה קינמטית אחת ובמראה נפתחת אחת כדי ליישר את נתיבי קורות היישור והעירור.
מקם את המראה הריבועית באופן אקסיאלי על שלב הדגימה של מטרה 1 כדי למזער את פרופיל הקרן לאחר הדיכרואיק. הכנס SL2 ו- TL2 בנתיב הפליטה במרחקים המתאימים. כוונן את ידיות XY ואת ההטיה של מטרה 2 כך שקרן היישור האדומה תעבור דרך הקשתית ודיסק הזכוכית החלבית.
כוונן את שלב התרגום 2 עד שהקרן יוצרת דיסק אוורירי קטן על פני השטח, ולאחר מכן המשך לכוונן את שלב התרגום 2 כדי למזער את גודל הדיסק האוורירי. כדי למטב את הגאלבו להטיה בסריקת וריאנטים, לחץ על לחצן FSK במחולל צורת הגל כדי לבחור אות גל משולש עבור הגאלבו ולהגדיר אותו לתדר נמוך, כגון 1 הרץ. שימו לב לאלומת היישור על אותו משטח או קיר מרוחק.
הרכיבו את יעד 3 כ-4-5 מילימטרים לפני יעד 2 בזווית של 0 מעלות והתאימו את הגובה בהתאם. מקם דיסק יישור זכוכית חלבית במישור המוקד המשותף בין SL2 ו- TL2 כפי שנמדד באמצעות סרגל. ברגע שנורית הפליטה ממלאת את הצמצם האחורי של O3, הרכיבו דיסק זכוכית חלבית במיקום המחוספס של חיישן המצלמה ויישרו את מרכז הדיסק לאור הפליטה היוצא מ-O3. מקם את TL3 מאחורי יעד 3 וכוונן את ההטיה כדי ליישר את האור היוצא עם דיסק הזכוכית החלבית.
מקם את המצלמה במרחק הנמדד מעדשת הצינור וכוונן את יעד 3 באופן אקסיאלי משלב תרגום הכלוב עד שהחור ממוקד במצלמה. כוונן מחדש את יעד 3 בזווית של 30 מעלות מהציר האופטי של מטרה 2 באמצעות הקווים שבטבלה כקו מנחה. הרכיבו מחדש את יעד בדיקת הרשת החיובית באותו גובה ציר והאירו את הרשת באור השדה הבהיר.
טאטא אופקית את החלק הממוקד של שדה הראייה על-פני המסך, כאשר ריבועי הרשת שומרים על גודל אחיד. כדי ליישר את יריעת האור האלכסונית, מקם עדשות גליליות או CL, כך שהקרן ממוקדת לפרופיל יריעה אופקי במישור המוקד של CL3. הכנס ומקם חריץ בכיוון האנכי במישור המוקד בין CL3 לעדשה 3.
בחיישן המצלמה, ודא שגיליון האור של 0 מעלות נראה דק ואנכי. באמצעות בקרת שלב התרגום הממונעת, תרגם את M1 לכיוון העדשות הגליליות כדי לסובב את יריעת האור. הכנס את דגימת בדיקת הרודמין שכותרתה מיקרוטובול שהוכנה מראש לשלב הדגימה וכוונן אותה באופן אקסיאלי כך שהצבע יואר על ידי יריעת האור בחמישה עומקים שונים בין מרכז שדה הראייה לצד הימני של המסך.
לאחר מכן שמרו כל תמונה. פתח את התמונות בפיג'י. לכל תמונה, בעזרת הכלי קו, צייר קו אופקי ממרכז שדה הראייה למרכז גיליון האור.
לאחר מכן עבור אל ניתוח, ואחריו פרופיל העלילה כדי לחשב את זווית גיליון האור מעל 01. לאחר כיול המכשיר, הרכיבו את דוגמת החרוז התלת מימדית שהוכנה מראש ולחצו על כפתור FSK במחולל הפונקציות כדי להגדיר גל משולש. כדי למצוא את הדגימה, השתמש במחולל הפונקציות כדי להגדיר את הפרמטרים החל מתדר 20 מגה-הרץ, 400 מיליוולט משיא לשיא משרעת ו-0.4 היסט.
גלול ב- Z ידנית עד שתגיע למישור הדגימה ומטב את ההגדרה Z. בתוכנית המיקרומנג'ר, בחר זמן חשיפה ופתח את חלון הרכישה הרב-מימדי. הגדר את מרווח הזמן ל- 30 והשתמש בתיבת הספירה לבחירת מספר המסגרות.
לאחר הגדרת הפרמטרים, רשום פרק זמן עבור סריקה מלאה אחת של אמצעי האחסון. הסריקות הנפחיות של רשת המיקרוטובולים המשוחזרת הראו כי המבנים התלת-ממדיים נעשו צפופים לכיוון המרכז, וכתוצאה מכך נוצרו אזורים בהירים של פלואורסצנטיות. במישורי הדמיה ליד חלקת הכיסוי, מיקרוסקופ קונפוקלי פתר חוטים בודדים סביב הפריפריה של Astar עם רקע נוסף לכיוון המרכז עקב אותות פלואורסצנטיים לא ממוקדים מלמעלה.
עם זאת, הזזת כמה מיקרונים ב-Z הפחיתה במהירות את איכות התמונות בשל החלקים הצפופים והלא ממוקדים של ה-Astar. התאורה החד-מישורית של יריעת האור ביטלה את האותות שיצאו מהפוקוס, ואפשרה איכות תמונה דומה בין המישורים.
