Till att börja med, frys och tina en frusen råttmjälte tre gånger för att lysera mjältcellerna. På en ren bänk sätter du upp en peristaltisk pump, en tvåliters behållare, ett silikonrör med en innerdiameter på 2,4 millimeter och en bubbelfälla. Fyll perfusionssystemet med avjoniserat vatten.
Håll den igång i 10 minuter. Överför försiktigt den skördade mjälten till den avjoniserade vattenfyllda behållaren. Anslut sedan silikonslangen till venkatetern som har förts in i mjältartären.
Utför perfusion med avjoniserat vatten, 0,1% SDS, 1% Triton X-100 och PBS-lösningar. Fyll ett 50-milliliters centrifugrör med PBS som innehåller 10% penicillinstreptomycin. Överför den decellulariserade mjältmatrisen till PBS.
Förvara den vid minus 20 grader Celsius tills du experimenterar vidare. Den fullständiga decellulariseringen av mjälten uppnåddes på cirka 11 timmar. Färgen övergick gradvis från djupröd till en modellerad ljusröd och så småningom ett vitt genomskinligt utseende, med en övergripande morfologi som förblev intakt.