制备电感受态细胞以在外排缺陷细菌菌株中实现单拷贝基因表达

首先，将所有无菌的 1.5 毫升微量离心管和无菌电穿孔比色皿放在冰上。然后将一瓶储存在四摄氏度的无菌水放在冰上。将 1.5 毫升过夜细菌培养物转移到 1.5 毫升微量离心管之一中，并以 13， 000 G 离心两分钟以沉淀细胞。

使用一毫升移液管，在不干扰细胞沉淀的情况下除去所有上清液。将另外1.5毫升细菌培养物加入同一微量离心管中，以13,000G离心两分钟并除去上清液。向细胞沉淀中加入一毫升冰冷的无菌水，并用轻柔的移液重新悬浮，直到沉淀不再位于微量离心管的底部。