Pour commencer, rassemblez toutes les ressources nécessaires et nettoyez la seringue, le tube et la canule Hamilton avec de l’éthanol à 70 %, suivi d’une solution saline. Après les avoir remplis de solution saline, collez la seringue Hamilton horizontalement sur le banc. Ensuite, préparez l’appareil d’anesthésie Isoflurane et réchauffez le coussin chauffant à 37 degrés Celsius.
Couvrez les extrémités de la pince fixée au joint universel solide avec un morceau de tube en polyéthylène pour former une boucle. À l’aide d’une pipette de 200 microlitres et d’une pointe, transférez les sphéroïdes hépatiques de la plaque à 96 puits dans une boîte de suspension à cellules de 35 millimètres contenant un milieu de maintenance. Après avoir anesthésié la souris, transférez-la sur le coussin chauffant et immobilisez la tête avec les vis.
Ensuite, sortez doucement l’œil de l’orbite et fixez-le avec la pince. Pour éviter le dessèchement, placez une goutte de solution saline sur les deux yeux. Avec la seringue Hamilton, aspirez les sphéroïdes du foie sous le stéréoscope.
Placez la canule horizontalement sur une surface propre. À l’aide d’une aiguille de calibre 23, percez soigneusement la cornée et faites glisser l’aiguille sur le côté pour élargir l’incision. Séchez l’humeur aqueuse suintante avec un mouchoir en papier et ajoutez des gouttes salines dans l’œil pour le garder humide.
Positionnez la canule à la verticale pour laisser les sphéroïdes du foie graviter vers l’extrémité, puis insérez-la doucement dans le trou. À l’aide de la seringue Hamilton, expulsez lentement les stéroïdes hépatiques dans l’ECA. À l’aide de l’extrémité de la canule, poussez doucement la cornée de l’extérieur pour positionner les sphéroïdes hépatiques autour de la pupille.
Après 5 à 10 minutes, relâchez l’œil de la pince. Pour lubrifier et guérir la cornée, appliquez une pommade oculaire à la vaseline sur l’œil opéré. Avant de réveiller la souris, administrez l’analgésique par voie sous-cutanée pour éviter l’inconfort postopératoire.