转染 HEK293 细胞的细胞裂解和免疫沉淀的蛋白质样品制备

转染 HEK 293 细胞后约 48 小时，用冰冷的 PBS 洗涤细胞三次。将 500 微升含有蛋白酶抑制剂的蛋白质裂解缓冲液加入培养皿中。使用细胞刮刀收集细胞，并将它们添加到冰上蛋白质吸收低的试管中。

每 5 分钟涡旋一次试管，然后继续在冰上孵育 10 分钟。将样品以 16、400G 在 4 摄氏度下离心 10 分钟。收集上清液并将其转移到蛋白质吸收低的新鲜 1.5 毫升管中。

确定蛋白质浓度后，在新鲜管中分离 200 至 1， 000 微克蛋白质。加入蛋白质裂解