Para empezar, coloque un corazón espejo incrustado grueso y una solución de metanol al 20% durante una hora. Transfiere secuencialmente el corazón a concentraciones crecientes de metanol para deshidratarlo. Coloque las soluciones con el corazón en un mezclador a 60 hercios durante la deshidratación, transfiera el corazón deshidratado a una solución fresca de metanol al 100%.
Después de reemplazar la solución con metanol fresco al 100%, coloque el corazón a cuatro grados centígrados durante 10 minutos. Ahora aspira la solución. Luego agregue 200 mililitros de peróxido de hidrógeno al 5% en metanol para blanquear el corazón.
Incubar el corazón en la solución durante la noche a cuatro grados centígrados. Al día siguiente, transfiera la muestra a metanol al 100% después de la incubación, transfiérala a una solución que contenga 66% de diclorometano y 33% de metanol. El corazón debe hundirse hasta el fondo del vial.
Coloque la muestra en una batidora durante tres horas para asegurar la dilapidación completa del corazón. Finalmente, incube la muestra en dibenzylether para que coincida con el índice de refracción. El tejido del corazón del ratón P1 se volvió transparente en cuatro días, mientras que un ratón de ocho semanas se volvió transparente en siete días.