Para começar, descongele os frascos de estoque de vetor viral em gelo por 20 minutos e dilua as partículas de AAV em 100 microlitros de DPBS. Carregue a solução diluída de AAV em uma seringa de um mililitro com uma agulha de calibre 28 a 30, evitando bolhas de ar. Prenda o mouse anestesiado em um limitador iluminador de cauda.
E use uma gaze para limpar o local da injeção com um anti-séptico. Massageie a cauda com dois dedos até que a veia seja observada. Em seguida, injete o vetor na veia da cauda em um ângulo baixo e retire a agulha.
Usando um dedo, aplique pressão imediatamente no local injetado para parar o sangramento. Para preparar o poloxâmero 407, dissolva-o em DPBS em um rotador durante a noite a quatro graus Celsius em um gabinete de biossegurança. Em seguida, prenda o mouse manualmente sob um exaustor, posicionando sua cabeça e corpo para baixo.
Com um anti-séptico, limpe o local da injeção no quadrante inferior esquerdo do abdômen lateral à linha média. Para injetar P407, insira a agulha na cavidade peritoneal em um ângulo de 45 graus ou menos. Após quatro semanas de indução da hiperlipidemia, o ecocardiograma revelou insuficiência cardíaca com fração de ejeção preservada, pois o tempo de relaxamento intraventricular foi prolongado.
Observou-se um aumento da relação entre a velocidade do fluxo magro mitral precoce e a velocidade diastólica precoce do anel mitral, juntamente com uma diminuição da velocidade do fluxo transmitral diastólico precoce para tardio.