ACE2 का संयुग्मन और SARS-CoV-2 संक्रमित कोशिकाओं से वायरल कणों को पकड़ने के लिए चुंबकीय माइक्रोसेफर्स को नियंत्रित एंटीबॉडी

शुरू करने के लिए, 1.5 मिलीलीटर कम प्रोटीन बाध्यकारी माइक्रोफ्यूज ट्यूब में एमईएस बफर में न्यूट्राविडिन के काम कर समाधान तैयार करें। फिर एमईएस बफर में बकरी इम्युनोग्लोबुलिन जी नियंत्रण एंटीबॉडी का काम समाधान तैयार करें। भंवर पतला एंटीबॉडी समाधान, और ट्यूब अपकेंद्रित्र।

अगला, सक्रिय मोती युक्त Microtiter प्लेट ले लो और मोती स्थिर करने के लिए 30 सेकंड के लिए एक चुंबकीय प्लेट विभाजक पर जगह है. माइक्रोटिटर प्लेट के साथ अभी भी चुंबकीय विभाजक पर तैनात है, चुंबक स्थिर मोतियों से सतह पर तैरनेवाला महाप्राण है। फिर मोतियों युक्त उपयुक्त कुओं में न्यूट्राएविडिन समाधान, एंटीबॉडी समाधान और एमईएस बफर के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें।

माइक्रोटिटर प्लेट को सील करें और कमरे के तापमान पर अंधेरे में 650 आरपीएम पर एक कक्षीय शेकर पर दो घंटे के लिए इनक्यूबेट करें। फिर एक स्वचालित वॉशर का उपयोग करके पीबीएसटी के साथ मोती धो लें। रातोंरात इनक्यूबेशन के बाद, 10 मिलीमोलर पीबीएस में पुनः संयोजक मानव बायोटिनिलेटेड एसीई 2 और बायोटिन काम करने वाले समाधान तैयार करें।

30 सेकंड के लिए चुंबकीय प्लेट विभाजक पर microspheres स्थिरीकरण, और चुंबक immobilized microspheres से सतह पर तैरनेवाला महाप्राण, जैसा कि पहले दिखाया गया है. चुंबकीय विभाजक से माइक्रोटिटर प्लेट निकालें, और प्रत्येक अच्छी तरह से 10 मिलीमोलर पीबीएस के 50 माइक्रोलीटर जोड़ें। फिर बायोटिनिलेटेड ACE2 और बायोटिन वर्किंग सॉल्यूशन के 100 माइक्रोलीटर को न्यूट्राएविडिन संयुग्मित माइक्रोसेफर्स युक्त उपयुक्त कुओं में जोड़ें।

माइक्रोटिटर प्लेट को सील करें, और एक कक्षीय शेकर पर एक घंटे के लिए इनक्यूबेट करें, जैसा कि पहले दिखाया गया है। माइक्रोसेफर्स को धोने के बाद, ACE2 और बायोटिन संयुग्मित माइक्रोसेफर्स को स्टोर करें।