For at begynde skal du fylde en milliliters sprøjte med 500 mikroliter kontinuerlig fase. Fastgør PTFE-mikroslangen til en 27 gauge 0.75 tommer nål. Monter enheden på sprøjten og derefter på sprøjtepumpen.
Stans derefter et hul ved hjælp af en 0,75 millimeter biopsistans midt i en PDMS-udskæring. Træk cirka tre centimeter PTFE-slange gennem hullet i udskæringen, og skub enheden ind i toppen af en 200 mikroliters pipettespids. Forsegl stikket med UV-hærdende lim oven på pipetten, og fastgør den anden side af røret til en 23 gauge 1.25 tommer nål.
Fyld derefter to en milliliter sprøjter med 500 mikroliter let mineralolie. Fastgør to 23 gauge nåle med de specialfremstillede tilbehør og monter dem på sprøjtepumpen. Brug sprøjtepumpens styringssoftware til at aspirere funktionaliserede nanopartikler og celleopløsninger ind i pipettespidsen af de vandige faser.
Efter rengøring af det forberedte observationskammer skal du klemme kammeret fast i den trykte kammerholder udstyret med to neodymmagneter ved 30 grader. Åbn nu begge porte og sæt et papirhåndklæde i den øverste port for at absorbere den overskydende ydre fase under påfyldning. Tilslut den kontinuerlige fase til det øverste indløb på mikrofluidchippen.
Skyl derefter chippen med den kontinuerlige fase i ca. 30 sekunder med en strømningshastighed på 1800 mikroliter i timen. Fastgør pipettespidserne på de vandige opløsninger til de to midterste indløb på chippen. Start strømmen af den vandige opløsning ved 200 mikroliter i timen for hver opløsning.
Når væsken vises ved udløbet, skal du begynde den fluorerede oliefasestrøm med 800 mikroliter i timen. Vent, indtil der er etableret en stabil dråbeproduktion, angivet med en homogen grå, skinnende opløsning ved udløbet. Tilslut derefter PTFE-mikroslangen til udløbsporten for at opsamle dråberne.
Brug hylstermodulet i en fingertæt beslag i ét stykke til at lede dem ind i et observationskammer. Når kammeret er fyldt, skal du stoppe flowet og lukke portene med portpropper ved hjælp af fingertæt tryk. Efter dråbeproduktion skylles spånen med fluoreret olie, efterfulgt af nitrogen, for at blæse eventuel resterende væske ud.
Monter kammerholderen på mikroskopet med et brøndpladeformattrin. Brug derefter 10x-objektivet til at skifte mikroskopet til lysfeltkanalen. Fokuser på de immobiliserede dråber i lysfeltet, og flyt til midten af kammeret.
Aktiver derefter det automatiserede fokuseringssystem. Juster måleplanet på lysfeltkanalen, så dråbekanterne fremstår som skarpe sorte cirkler, der let kan skelnes fra oliefasen og baggrunden. Gå gennem hver af fluorescenskanalerne, og indstil det optimale måleplan for dem.
Til flytningsmålinger skal du fokusere på nanopartikelaggregatet i FITC-, TRITC- og Cyanine5-kanalerne.