首先，将小鼠手术所需的所有材料放在手术台上。将麻醉的鼠标放在桌子上，确保枕头在它的脖子下。每种消毒剂交替使用优碘或洗必泰和酒精的循环拭子 3 次，对手术部位进行消毒。
进行脚趾捏合以确认麻醉深度。使用手术胶带，约束小鼠的前肢。在解剖显微镜下，将小鼠颈部的腹面置于视野中，并调整放大倍率以舒适地观察手术部位。
做一个 1 厘米的纵向中线切口后，将闭合剪刀的尖端插入切口并轻轻打开，对皮下结缔组织进行钝性解剖，分离两个唾液腺。在细镊子的帮助下，轻轻地将右侧唾液腺通过切口拉出，使其停留在外表面，或使用钝钩牵开器横向缩回唾液腺。继续对结缔组织进行钝性解剖，直到可以看到胸锁乳突肌和二腹肌。
使用斜尖镊子，继续仔细解剖肌肉三角尾端附近的结缔组织，以暴露颈静脉、迷走神经和颈总动脉 （CCA）。继续解剖 CCA 周围的结缔组织，从肌肉三角基部到舌骨肌。使用小棉球控制任何轻微出血并吸收唾液腺分泌的液体。
解剖结缔组织以将 CCA 与迷走神经分开，特别注意尽量减少对迷走神经的处理和损伤。动员 CCA 后，将一根 1 厘米长的 6-0 缝合线放在胸骨上，并将斜尖镊子穿过 CCA 下方。右手拿着斜尖镊子，左手拿着细镊子，将缝合线传到斜尖镊子上，并抓住缝合线末端附近。
在 CCA 下轻轻拉动缝合线长度的一半。放置第二根缝合线后，将每根缝合线松散地系在 CCA 周围，不要收紧打结或限制血液流动。使用斜尖镊子，小心地去除舌骨肌上方肌肉三角形顶端的结缔组织，以定位 CCA 及其分叉到颈外动脉和颈内动脉。
然后在胸骨上缝合一段，小心地清除分叉附近颈外动脉各个侧面的结缔组织。将斜尖镊子穿过颈外动脉下方。用左手的细镊子，将缝合线传到颈内外动脉之间空隙中的斜尖镊子上，然后轻轻拉动缝合线长度的一半。
将缝合线松散地系在颈外动脉周围，不要打结。要准备弯曲的针头，请握住一根 33 号半英寸的针头，斜面朝上。用无菌针头驱动器抓住针尖，并将其向斜面弯曲约 30 至 40 度。
收紧颈外动脉周围的缝合线结。然后将 CCA 上的下缝线尽可能滑向胸锁乳突肌，并收紧打结。在空腔边缘放置一个棉球，以吸收注射过程中分泌的液体和血液。
右手握住注射器，左手握住细镊子，将针头带到 CCA 下缝合线正上方的动脉。用细镊子轻轻地沿尾部方向拉动下缝合线的松散端，以在 CCA 上施加低水平的张力。将针头插入刚过斜面的 CCA，然后慢慢释放缝合线的张力。
用左手推动注射器柱塞，缓慢注入含有目标试剂或对照剂的溶液。然后用细镊子抓住 CCA 上松散的上缝合线，并抬起以扭结动脉。取下针头并将注射器放在一边。
用右手的斜尖镊子，将扭结保持在动脉中，并拧紧 CCA 上缝合线中的结。使用棉球吸收手术腔内残留的血液。在 CCA 上找到注射部位并确定需要闭合的缝合线数量。
用无菌盐水彻底冲洗 CCA 隔离区域的注射部位和管腔，以去除凝固的血液。使用斜尖镊子，将 9-0 缝合针靠近污水。握住动脉，用细镊子轻轻地将 CCA 两侧压在一起。
然后将针头穿过动脉两侧，咬一口即可缝合。要用外科医生的结闭合切口部位，请用细镊子和斜尖镊子进行器械打结，至少要掷四次。使用细镊子，解开并取下颈外动脉周围的缝合线，然后在 CCA 上缝合以恢复血液循环。
慢慢松开 CCA 上的下缝合线，但不要立即解开。确认注射部位充分闭合后，取下上下 CCA 缝合线。将唾液腺重新定位在腔中，并使用无菌缝合包，每 3 到 4 毫米缝合一根缝合线。
颈动脉内注射 GFP 标记的人间充质干细胞后，脑切片免疫组化显示存在 GFP 阳性细胞，表明骨髓人间充质干细胞归巢到神经胶质瘤。在 CCA 连接和 CCA 修复程序之间未观察到 GFP 人间充质干细胞归巢效率的显着差异。GFP 人间充质干细胞在肿瘤内的分散性显示，CCA 连接组和 CCA 修复组在高倍视野中 GFP 阳性细胞的中位计数没有显著差异。
