For at begynde skal du arrangere alle de materialer, der kræves til musekirurgi på operationsbordet. Placer den bedøvede mus på bordet, og sørg for, at puden er under nakken. Desinficer operationsstedet ved skiftevis cirkulære vatpinde af betadin eller klorhexidin og alkohol tre gange pr. desinfektionsmiddel.
Udfør en tåklemme for at bekræfte dybden af anæstesien. Brug kirurgisk tape til at fastholde musens forben. Under et dissektionsmikroskop skal du bringe den ventrale overflade af musens hals til syne og justere forstørrelsen for at observere operationsstedet komfortabelt.
Efter at have lavet et længdelængdesnitt på en centimeter skal du indsætte spidsen af den lukkede saks i snittet og forsigtigt åbne den for at udføre en stump dissektion af det subkutane bindevæv, der adskiller de to spytkirtler. Ved hjælp af en fin pincet trækkes forsigtigt den højre spytkirtel gennem snittet for at hvile på den udvendige overflade, eller brug en stump krogretraktor til at trække spytkirtlen sideværts. Fortsæt med den stumpe dissektion af bindevævet, indtil sternocleidomastoid og de digastriske muskler er synlige.
Ved hjælp af en vinklet pincet fortsætter du den omhyggelige dissektion af bindevæv nær den kaudale ende af muskeltrekanten for at blotlægge halsvenen, vagusnerven og den fælles halspulsåre eller CCA. Fortsæt med at dissekere bindevævet omkring CCA fra bunden af den muskulære trekant til omohyoid muskel. Brug små vatrondeller til at kontrollere enhver mindre blødning og til at absorbere udskilte væsker fra spytkirtlerne.
Disseker bindevæv for at adskille CCA fra vagusnerven, og vær særlig omhyggelig med at minimere håndtering af og beskadigelse af vagusnerven. Efter mobilisering af CCA skal du placere et stykke 6-0 sutur på brystbenet og føre den vinklede spidspincet under CCA'en. Med den vinklede spidspincet i højre hånd og den fine pincet i venstre hånd føres suturen til den vinklede spidspincet og griber fat nær enden af suturen.
Træk forsigtigt halvdelen af suturens længde under CCA. Efter at have placeret en anden sutur, bind hver sutur løst rundt om CCA uden at stramme knuderne eller begrænse blodgennemstrømningen. Brug den vinklede spidspincet til forsigtigt at fjerne bindevæv i den øverste ende af den muskulære trekant over omohyoid muskel for at lokalisere CCA og dens bifurkation ind i den ydre halspulsåre og indre halspulsåre.
Læg derefter et stykke sutur på brystbenet og fjern forsigtigt bindevæv fra alle sider af den ydre halspulsåre nær bifurkationen. Før den vinklede spidspincet under den ydre halspulsåre. Med den fine pincet i venstre hånd føres suturen til den vinklede spidspincet i mellemrummet mellem den indre og ydre halspulsåre og trækkes forsigtigt halvdelen af suturens længde.
Bind surturen løst rundt om den ydre halspulsåre uden at stramme knuden. For at forberede den bøjede nål skal du holde en 33-gauge halv tomme nål med skråningen opad. Tag fat i spidsen af nålen med en steril nåledriver, og bøj den ca. 30 til 40 grader mod fasen.
Spænd knuden på suturen omkring den ydre halspulsåre. Skub derefter den nederste sutur på CCA mod sternocleidomastoidmusklen så langt som muligt, og stram knuden. Placer en vatrondel i kanten af hulrummet for at absorbere udskilt væske og blod under injektionen.
Hold sprøjten i højre hånd og den fine pincet i venstre hånd, før nålen til arterien umiddelbart over den nederste sutur på CCA. Med den fine pincet trækkes forsigtigt i den løse ende af den nederste sutur i en kaudal retning for at placere et lavt spændingsniveau på CCA'en. Indsæt nålen i CCA lige forbi fasen og slip langsomt spændingen fra suturen.
Tryk på sprøjtestemplet med venstre hånd for langsomt at injicere opløsningen, der indeholder det pågældende middel eller kontrolmiddel. Tag derefter fat i den løst bundne øvre sutur på CCA med den fine pincet og løft for at knække arterien. Fjern nålen og læg sprøjten til side.
Med den vinklede spidspincet i højre hånd skal du holde knækket i arterien og stramme knuden i den øverste sutur på CCA. Brug vatrondele til at absorbere eventuelt resterende blod i operationshulen. Find injektionsstedet på CCA'en, og bestem antallet af suturer, der skal bruges til at lukke.
Skyl injektionsstedet og lumen i det isolerede område af CCA grundigt med sterilt saltvand for at fjerne koaguleret blod. Brug den vinklede spidspincet til at tage fat i 9-0 suturnålen tæt på spildevandet. Hold arterien og tryk forsigtigt CCA-siderne sammen med den fine pincet.
Før derefter nålen og suturen gennem begge sider af arterien med en enkelt bid. For at lukke snitstedet med en kirurgknude skal du udføre et instrumentbånd med den fine pincet og den vinklede spidspincet med mindst fire kast. Brug den fine pincet til at løsne og fjerne suturen omkring den ydre halspulsåre, efterfulgt af en øvre sutur på CCA for at genoprette cirkulationen.
Løsn langsomt den nederste sutur på CCA'en, men løsn den ikke med det samme. Når det er bekræftet, at injektionsstedet er tilstrækkeligt lukket, fjernes de øvre og nedre CCA-suturer. Placer spytkirtlen i hulrummet, og luk snittet med en steril suturpakke med en sutur placeret hver tredje til fjerde millimeter.
Efter intracarotisinjektion af GFP-mærkede knoglemarvshumane mesenkymale stamceller afslørede immunhistokemi af hjernesektioner tilstedeværelsen af GFP-positive celler, hvilket indikerer målretning af knoglemarvshumane mesenkymale stamceller til gliomerne. Der blev ikke observeret nogen signifikant forskel i GFP-effektiviteten af humane mesenkymale stamceller mellem CCA-ligering og CCA-reparationsprocedurer. Dispersionen af GFP-humane mesenkymale stamceller i tumoren afslørede ingen signifikant forskel mellem mediantallet af GFP-positive celler i højtydende felter mellem CCA-ligerings- og CCA-reparationsgrupperne.
