כדי להתחיל, סדרו את כל החומרים הדרושים לניתוח עכבר על שולחן הניתוחים. הניחו את העכבר המרדים על השולחן, וודאו שהכרית נמצאת מתחת לצווארו. יש לחטא את אתר הניתוח על ידי מקלונים עגולים לסירוגין של בטדין או כלורהקסידין ואלכוהול שלוש פעמים לכל חומר חיטוי.
בצע צביטת בוהן כדי לאשר את עומק ההרדמה. באמצעות סרט כירורגי, לרסן את הגפיים הקדמיות של העכבר. תחת מיקרוסקופ מנתח, הביאו את משטח הגחון של צוואר העכבר לתצוגה וכוונו את ההגדלה כדי לצפות באתר הניתוח בנוחות.
לאחר ביצוע חתך קו אמצע אורכי של סנטימטר אחד, יש להכניס את קצה המספריים הסגורים לחתך ולפתוח אותו בעדינות כדי לבצע דיסקציה קהה של רקמת החיבור התת עורית, המפרידה בין שתי בלוטות הרוק. בעזרת מלקחיים עדינים, משכו בעדינות את בלוטת הרוק הימנית דרך החתך כדי לנוח על המשטח החיצוני, או השתמשו במושך וו קהה כדי למשוך את בלוטת הרוק לרוחב. המשך עם דיסקציה קהה של רקמת החיבור עד sternocleidomastoid ואת שרירי digastric גלויים.
באמצעות מלקחיים בעלי קצה זוויתי, המשיכו בדיסקציה זהירה של רקמת החיבור ליד הקצה הקאודלי של המשולש השרירי כדי לחשוף את הווריד הצווארי, עצב הואגוס ועורק התרדמה המשותף, או CCA. המשך לנתח את רקמת החיבור סביב CCA מבסיס המשולש השרירי לשריר האומוהיואיד. השתמשו בכדורי צמר גפן קטנים כדי לשלוט בכל דימום קל ולספוג נוזלים המופרשים מבלוטות הרוק.
לנתח רקמת חיבור כדי להפריד את CCA מן העצב התועה, תוך נקיטת טיפול מיוחד כדי למזער את הטיפול ואת הנזק לעצב התועה. לאחר גיוס CCA, מניחים חתיכה של סנטימטר אחד של תפר 6-0 על עצם החזה ומעבירים את המלקחיים הזוויתיים מתחת ל- CCA. עם מלקחיים זוויתיים ביד ימין ומלקחיים עדינים ביד שמאל, מעבירים את התפר למלקחיים הזוויתיים ואוחזים קרוב לקצה התפר.
משכו בעדינות מחצית מאורך התפר מתחת ל-CCA. לאחר הנחת תפר שני, יש לקשור באופן רופף כל תפר סביב ה-CCA מבלי להדק את הקשרים או להגביל את זרימת הדם. בעזרת המלקחיים הזוויתיים יש להסיר בזהירות את רקמת החיבור בקצה העליון של המשולש השרירי מעל שריר האומוהיואיד כדי לאתר את ה-CCA ואת התפצלותו לעורק התרדמה החיצוני ולעורק התרדמה הפנימי.
לאחר מכן מניחים חתיכת תפר על עצם החזה ומפנים בזהירות את רקמת החיבור מכל צידי עורק התרדמה החיצוני ליד הביפורקציה. מעבירים את המלקחיים הזוויתיים מתחת לעורק התרדמה החיצוני. עם המלקחיים העדינים ביד שמאל, מעבירים את התפר למלקחיים הזוויתיים ברווח שבין עורק התרדמה הפנימי והחיצוני ומושכים בעדינות מחצית מאורך התפר.
קשרו באופן רופף את התפר סביב עורק התרדמה החיצוני מבלי להדק את הקשר. כדי להכין את המחט המכופפת, החזיקו מחט בגודל 33 אינץ' עם שיפוע כלפי מעלה. אחזו בקצה המחט עם דרייבר מחט סטרילי וכופפו אותו בערך 30 עד 40 מעלות לכיוון השיפוע.
הדקו את קשר התפר סביב עורק התרדמה החיצוני. לאחר מכן החליקו את התפר התחתון על CCA לכיוון שריר הסטרנוקלידומסטואיד ככל האפשר, והדקו את הקשר. מניחים כדור צמר גפן בקצה החלל כדי לספוג נוזלים מופרשים ודם במהלך ההזרקה.
מחזיקים את המזרק ביד ימין ואת המלקחיים העדינים ביד שמאל, מביאים את המחט לעורק ממש מעל התפר התחתון ב- CCA. בעזרת המלקחיים העדינים, משכו בעדינות את הקצה הרופף של התפר התחתון לכיוון קאודלי כדי ליצור רמת מתח נמוכה על ה-CCA. הכנס את המחט לתוך CCA ממש מעבר לשיפוע ושחרר לאט מתח מהתפר.
ביד שמאל, לדחוף את הבוכנה מזרק להזריק לאט את הפתרון המכיל את סוכן עניין או שליטה. לאחר מכן אחזו בתפר העליון הקשור באופן רופף על CCA עם המלקחיים העדינים והרימו כדי לעקם את העורק. הסר את המחט ושים את המזרק בצד.
עם המלקחיים הזוויתיים ביד ימין, לשמור את הקינק בעורק ולהדק את הקשר בתפר העליון על CCA. באמצעות כדורי צמר גפן, לספוג כל שאריות דם בתוך חלל הניתוח. אתר את אתר ההזרקה ב- CCA וקבע את מספר התפרים הדרושים לסגירה.
להשקות את אתר ההזרקה ואת לומן של האזור המבודד של CCA ביסודיות עם מלוחים סטריליים כדי להסיר דם קרוש. בעזרת המלקחיים הזוויתיים אוחזים את מחט התפר 9-0 קרוב לביוב. החזיקו את העורק ולחצו בעדינות על דפנות ה-CCA יחד עם המלקחיים העדינים.
לאחר מכן להעביר את המחט ואת התפר דרך שני צידי העורק עם נשיכה אחת. כדי לסגור את מקום החתך עם קשר מנתח, בצע קשירת מכשיר עם מלקחיים עדינים ומלקחיים זוויתיים באמצעות מינימום של ארבע זריקות. בעזרת המלקחיים העדינים, להתיר ולהסיר את התפר סביב עורק התרדמה החיצוני, ולאחר מכן תפר עליון על CCA כדי לשחזר את זרימת הדם.
שחררו לאט לאט את התפר התחתון על CCA, אך אל תתירו אותו מיד. לאחר אישור שאתר ההזרקה סגור מספיק, הסר את התפרים העליונים והתחתונים של CCA. מקמו מחדש את בלוטת הרוק בחלל ובעזרת חבילת תפר סטרילית סגרו את החתך בתפר אחד כל שלושה עד ארבעה מילימטרים.
לאחר הזרקה תוך-קרוטיד של תאי גזע מזנכימליים אנושיים המסומנים במח עצם המסומנים ב-GFP, אימונוהיסטוכימיה של חלקי מוח חשפה נוכחות של תאים חיוביים ל-GFP, דבר המצביע על ביות של תאי גזע מזנכימליים אנושיים ממח עצם לגליומות. לא נצפה הבדל משמעותי ביעילות הביות של תאי גזע מזנכימליים אנושיים GFP בין קשירת CCA לבין הליכי תיקון CCA. הפיזור של תאי גזע מזנכימליים אנושיים GFP בתוך הגידול לא גילה הבדל משמעותי בין הספירה החציונית של תאים חיוביים ל-GFP בשדות רבי עוצמה בין קשירת CCA לקבוצות תיקון CCA.
