For å begynne, ordne alt materialet som kreves for musekirurgi på operasjonsbordet. Plasser den bedøvede musen på bordet, og sørg for at puten er under nakken. Desinfiser operasjonsstedet ved å veksle sirkulære vattpinner med betadin eller klorheksidin og alkohol tre ganger per desinfeksjonsmiddel.
Utfør en tåklype for å bekrefte dybden på anestesien. Bruk kirurgisk tape til å holde musens forlemmer. Under et disseksjonsmikroskop, ta den ventrale overflaten av musens nakke til syne og juster forstørrelsen for å observere operasjonsstedet komfortabelt.
Etter å ha laget et snitt på en centimeter i lengderetningen, setter du spissen av den lukkede saksen inn i snittet og åpner den forsiktig for å utføre en stump disseksjon av det subkutane bindevevet, og skiller de to spyttkjertlene. Ved hjelp av en fin tang trekker du forsiktig den høyre spyttkjertelen gjennom snittet for å hvile på den ytre overflaten, eller bruk en sløv krokinntrekker for å trekke spyttkjertelen sideveis. Fortsett med den stumpe disseksjonen av bindevevet til sternocleidomastoid og de digastriske musklene er synlige.
Bruk tang med vinklet spiss, fortsett den forsiktige disseksjonen av bindevev nær den kaudale enden av muskeltrekanten for å eksponere halsvenen, vagusnerven og halspulsåren, eller CCA. Fortsett å dissekere bindevevet rundt CCA fra bunnen av muskeltrekanten til omohyoid muskel. Bruk små bomullsdotter for å kontrollere eventuelle mindre blødninger og for å absorbere utskilte væsker fra spyttkjertlene.
Disseker bindevev for å skille CCA fra vagusnerven, og vær spesielt forsiktig for å minimere håndtering av og skade på vagusnerven. Etter å ha mobilisert CCA, plasser et stykke 6-0 sutur på brystbenet på en centimeter og før den vinklede tuppen under CCA. Med den vinklede tuppen i høyre hånd og fin tang i venstre hånd, før du suturen til den vinklede tuppen og ta tak nær enden av suturen.
Trekk forsiktig halvparten av suturens lengde under CCA. Etter å ha plassert en andre sutur, bind hver sutur løst rundt CCA uten å stramme knutene eller begrense blodstrømmen. Bruk tangen med vinklet spiss, fjern forsiktig bindevev i den øvre enden av muskeltrekanten over omohyoid muskelen for å lokalisere CCA og dens bifurkasjon inn i den ytre halspulsåren og indre halspulsåren.
Legg deretter et stykke sutur på brystbenet og fjern bindevev forsiktig fra alle sider av den ytre halspulsåren nær bifurkasjonen. Før den vinklede tuppen under den ytre halspulsåren. Med den fine tangen i venstre hånd, før suturen til den vinklede tången i rommet mellom den indre og ytre halspulsåren og trekk forsiktig halvparten av suturens lengde.
Bind suturen løst rundt den ytre halspulsåren uten å stramme knuten. For å klargjøre den bøyde nålen, hold en 33-gauge halvtommers nål med skråkanten vendt opp. Ta tak i spissen av nålen med en steril nåledriver og bøy den ca. 30 til 40 grader mot skråkanten.
Stram knuten på suturen rundt den ytre halspulsåren. Skyv deretter den nedre suturen på CCA mot sternocleidomastoidmuskelen så langt som mulig, og stram knuten. Plasser en bomullsdott i kanten av hulrommet for å absorbere utskilt væske og blod under injeksjonen.
Hold sprøyten i høyre hånd og den fine tangen i venstre hånd, før nålen til arterien rett over den nedre suturen på CCA. Med den fine tangen, trekk forsiktig den løse enden av den nedre suturen i en kaudal retning for å plassere et lavt spenningsnivå på CCA. Sett nålen inn i CCA like forbi skråkanten og slipp sakte spenningen fra suturen.
Skyv sprøytestempelet med venstre hånd for å sakte injisere oppløsningen som inneholder det aktuelle legemidlet eller kontrollmidlet. Ta deretter tak i den løst bundne øvre suturen på CCA med den fine tangen og løft for å knekke arterien. Fjern kanylen og sett sprøyten til side.
Med den vinklede tuppen i høyre hånd, hold knekken i arterien og stram knuten i den øvre suturen på CCA. Bruk bomullsboller til å absorbere gjenværende blod i operasjonshulen. Finn injeksjonsstedet på CCA og bestem antall suturer som trengs for å lukke.
Skyll injeksjonsstedet og lumen i det isolerte området av CCA grundig med sterilt saltvann for å fjerne koagulert blod. Bruk den vinklede tuppen til å ta tak i 9-0 suturnålen nær kloakken. Hold arterien og trykk forsiktig CCA-sidene sammen med den fine tangen.
Før deretter nålen og suturen gjennom begge sider av arterien med et enkelt bitt. For å lukke snittstedet med en kirurgknute, utfør et instrumentbånd med den fine tangen og tangen med vinklet spiss med minst fire kast. Bruk den fine tangen, løsne og fjern suturen rundt den ytre halspulsåren, etterfulgt av en øvre sutur på CCA for å gjenopprette sirkulasjonen.
Løsne sakte den nedre suturen på CCA, men ikke løsne den umiddelbart. Etter å ha bekreftet at injeksjonsstedet er tilstrekkelig lukket, fjern øvre og nedre CCA-suturer. Plasser spyttkjertelen på nytt i hulrommet, og lukk snittet med en sutur plassert hver tredje til fjerde millimeter ved hjelp av en steril suturpakke.
Etter intracarotisinjeksjon av GFP-merkede benmargshumane mesenkymale stamceller, avslørte immunhistokjemi i hjerneseksjoner tilstedeværelsen av GFP-positive celler, noe som indikerer målsøking av benmargshumane mesenkymale stamceller til gliomene. Det ble ikke observert noen signifikant forskjell i GFP human mesenkymal stamcellemålsøkingseffektivitet mellom CCA-ligering og CCA-reparasjonsprosedyrer. Spredningen av GFP humane mesenkymale stamceller i svulsten avslørte ingen signifikant forskjell mellom median antall GFP-positive celler i kraftige felt mellom CCA-ligerings- og CCA-reparasjonsgruppene.
