Per iniziare, sciacquare il dente estratto con una soluzione salina sterile per rimuovere il sangue. Tagliare con cura il dente longitudinalmente in due pezzi utilizzando una fresa per fessure in metallo duro durante l'irrigazione con soluzione fisiologica sterile. Successivamente, trasportare il dente e la sua polpa intatta in terreni alfa-MEM sterili su ghiaccio al laboratorio di coltura cellulare e tissutale.
Quindi posizionare il campione di dente estratto in una piastra di Petri sterile per colture e risciacquare accuratamente tre o quattro volte con PBS sterile. Utilizzando un escavatore affilato e una pinza, rimuovere con cura il tessuto pulpare della cavità e pulire accuratamente con PBS sterile per rimuovere le tracce di sangue. Ora dividi la superficie del piatto in quattro parti mettendo da 1 a 2 millilitri di PBS sterile in ogni parte.
Posizionare il campione di tessuto pulpare in un'area e tagliarlo in piccoli pezzi utilizzando una lama chirurgica. Trasferire i pezzi di tessuto sollevandoli in aree successive con PBS. Nel frattempo, aggiungere circa 0,8-1 millilitro di alfa-MEM contenente aminoacidi non essenziali con il 10% di FBS e un cocktail di antibiotici in una piastra a sei pozzetti.
E spostalo per distribuire uniformemente i supporti. Vengono mostrate le varie fasi dello sviluppo della coltura primaria delle cellule staminali della polpa dentale. Il secondo giorno di semina sono state osservate cellule arrotondate a bolle di tessuto dentale.
Il quarto giorno è stata osservata una rete disordinata di cellule che uscivano dal tessuto. Tuttavia, entro il 13° giorno, il numero di cellule emerse dall'espianto è aumentato. E alla fine della seconda settimana, la maggior parte degli espianti è stata circondata da molte cellule aderenti con morfologia a forma di fuso.
