Para começar, aloque aleatoriamente os camundongos no grupo de controle ou lesão cerebral traumática leve repetitiva. Aclimate os camundongos em gaiolas separadas uma semana antes do experimento. Inspecione cuidadosamente o dispositivo de percussão de fluido modificado quanto a sinais de vazamento e certifique-se de que não haja bolhas presentes no sistema.
Depois de anestesiar e aparar o pelo da cabeça do rato, desinfete o couro cabeludo com etanol 75%. Prenda o mouse usando barras de ouvido não terminais em uma estrutura estereotáxica e coloque uma almofada de aquecimento isotérmica embaixo para manter a temperatura corporal em 37 graus Celsius. Limpe cuidadosamente a área cirúrgica usando um cotonete embebido em solução salina.
Depois de fazer uma incisão de 1,5 centímetro ao longo da linha média do couro cabeludo, use uma microbroca de ponta plana e uma lâmina microcirúrgica para criar uma janela fina do crânio no córtex motor frontal direito. Localize o local da cirurgia a 1,5 milímetros anteriores ao bregma e 1,3 a 2,0 milímetros laterais à linha média. Prenda uma trava Luer fêmea ajustada ao local do crânio fino.
Transfira o mouse do aparelho estereotáxico para a plataforma Impactor. Conecte a trava Luer fêmea à trava Luer macho na extremidade da tubulação do dispositivo de lesão por percussão de fluido. Para aplicar o impacto da lesão por percussão fluida, levante o pêndulo até o grau designado ao longo do transferidor no dispositivo e solte o pêndulo usando o controle de software, atingindo uma intensidade de percussão de aproximadamente duas atmosferas.
Após o impacto, desconecte imediatamente a conexão de trava Luer e transfira o mouse para uma almofada de aquecimento isotérmica para recuperação. Após a segunda lesão cerebral traumática, remova cuidadosamente a trava Luer feminina e o cimento dentário. Suturar o couro cabeludo com adesivo tecidual e usar pinças planas para beliscar o couro cabeludo para facilitar o processo adesivo.
Para aliviar a dor e o desconforto pós-cirúrgicos, aplique uma mistura individual de eritromicina e pomada de diclofenaco de sódio na ferida. Por fim, transfira o mouse para uma almofada de aquecimento isotérmica para recuperação. A análise de sete a 12 dias após a lesão usando o labirinto aquático de Morris mostrou que lesões cerebrais traumáticas leves repetidas levaram a deficiências no aprendizado espacial e na memória em camundongos.
O teste de campo aberto realizado seis dias após a lesão não mostrou impacto significativo nas habilidades locomotoras gerais dos camundongos, mas induziu ansiedade significativa e alterou o comportamento exploratório em camundongos com lesões cerebrais traumáticas leves repetidas. O teste do labirinto em Y realizado oito dias após a lesão revelou deficiências no trabalho espacial e na memória de referência em camundongos com lesões cerebrais leves repetidas.