食道生検による患者由来の気液界面(ALI)培養物の確立

まず、食道生検から単離された細胞を採取し、10マイクロモルのY27632を含む4ミリリットルのKSFMに再懸濁します。細胞をT25細胞培養フラスコに移します。ケラチノサイトが60%から80%のコンフルエンシーを持つ単層を形成したら、P1細胞を継代します。

次に、P2初代ケラチノサイトをTRANSWELLインサートに播種し、空気液体界面培養を行います。7日目に空輸を行うには、下部チャンバーの培地を高カルシウムKSFMに交換し、上部チャンバーから培地を吸引します。