Zu Beginn injizieren Sie den Versuchsmäusen intraperitoneal 0,1 Milliliter verdünnte Blutlösung, die mit Trypanosomao evansi oder PBS für die Kontrollgruppe infiziert war. Bevor Sie eine Grimasse-Bewertung durchführen, stellen Sie sicher, dass jede Maus in der Kammer gut sichtbar ist. Untersuchen Sie jede Maus auf das Fehlen von Läsionen an den Gliedmaßen, am Bauch und im Gesicht sowie auf Veränderungen im Fell.
Beobachten Sie den Orbitalbereich der Maus. Die geöffneten Augen der Maus zeigen die Abwesenheit von Schmerzen an, während geschlossene Augen auf spürbare Schmerzen hinweisen. Untersuchen Sie dann den Nasenbereich der Maus.
Kategorisieren Sie eine normale Nase als Abwesenheit von Schmerzen, während eine Ausbuchtung auf dem Nasenrücken spürbare Schmerzen bedeutet. Untersuchen Sie die Wangen der Maus und stufen Sie unveränderte Wangen als schmerzfrei ein. Das Vorhandensein von Ausbuchtungen auf beiden Wangen deutet auf spürbare Schmerzen hin.
Beobachten Sie als Nächstes die Positionierung der Ohren der Maus. Runde Ohren zeigen keine Schmerzen an, während nach außen oder hinten rotierende Ohren, die eine spitze Form vom Gesicht weg bilden, auf offensichtliche Schmerzen hinweisen. Untersuche die Schnurrhaare der Maus.
Klassifizieren Sie Schnurrhaare mit der natürlichen Abwärtskurve als Abwesenheit von Schmerzen, während Schnurrhaare, die entweder gegen die Wange zurückgezogen oder nach vorne gezogen werden, spürbare Schmerzen bedeuten. Infizierte Mäuse zeigten am Tag 3 nach der Infektion eine bemerkenswerte Verringerung der mechanischen Schwelle an der rechten Hinterpfote und blieben in den folgenden zwei Tagen niedriger als bei den Kontrollen. In ähnlicher Weise zeigte die abdominale taktile Empfindlichkeit bei infizierten Mäusen am Tag 3 nach der Infektion eine viszerale Allodynie, die in den folgenden zwei Tagen im Vergleich zu den Kontrollen anhielt.