首先,打开高分辨率呼吸测定法和真空系统。去除塞子,然后使用真空系统去除 70% 乙醇储存溶液。用超纯分子级水重新填充腔室。
最后一次洗涤后,向每个腔室中加入 2 毫升不含肌酸或 blebbistatin 的 MiRO5。打开呼吸测量软件。在弹出框中,将腔室搅拌器速度设置为 750 rpm,温度设置为 37 摄氏度,数据记录间隔为 2 秒。
将氧传感器的增益设置为 1,将极化电压设置为 800 毫伏。单击 Connect to Oxygraph 以建立与仪器的通信。在提示的对话框中,命名并保存包含当前数据和校准的实验文件。
记录氧气浓度至少 30 分钟,以使腔室预热并记录用于空气校准的信号。校准结束时,按住 Shift 键和鼠标左键,并在时间轴上的区域上拖动,以标记稳定的氧浓度区域。导航到 Oxygraph,然后是 氧气校准.
对于空气校准,请选择稳定的氧浓度标记,然后单击校准并复制到剪贴板。停止空气校准记录并保存文件。